【摘 要】
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本文采用细胞学和分子标记方法对甜瓜属人工异源四倍体(C.hytivus Chen and Kirkbride,2n=4x=38)的亲本染色体组间的交换重组进行了研究.通过对减数分裂中期I染色体行为观察,在108个花粉母细胞中有50个细胞具有多价体,占46.3﹪,染色体的平均构型为0.56Ⅰ+17.36Ⅱ+0.35Ⅲ+0.26Ⅳ+0.046Ⅴ+0.056Ⅵ,表明两亲本染色体组间发生了广泛的重组交换.
【机 构】
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作物遗传与种质创新国家重点实验室,南京农业大学(南京);中国农业科学院蔬菜花卉研究所(北京) 作物
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本文采用细胞学和分子标记方法对甜瓜属人工异源四倍体(C.hytivus Chen and Kirkbride,2n=4x=38)的亲本染色体组间的交换重组进行了研究.通过对减数分裂中期I染色体行为观察,在108个花粉母细胞中有50个细胞具有多价体,占46.3﹪,染色体的平均构型为0.56Ⅰ+17.36Ⅱ+0.35Ⅲ+0.26Ⅳ+0.046Ⅴ+0.056Ⅵ,表明两亲本染色体组间发生了广泛的重组交换.通过对400余条随机引物进行筛选,有5条引物产生了6条C.hytivus特征带.选取其中3条转换成SCAR标记,对13种甜瓜属不同基因型材料的DNA进行扩增,结果仅有SAP-03/700标记表现为特异性.进一步分析这一标记在人工异源四倍体(C.hytivus)、栽培黄瓜(C.sativus var.sativus)及野生黄瓜(C.sativus var.hardwickii)中扩增出的3条不同分子量条带序列,发现两端序列较为一致,中间部分不同,与黄瓜线粒体基因组序列有200bp左右的大小相同,但方向相反.
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根据从Pentadiplandra brazzeana Baillon中分离获得的Brazzein甜蛋白基因的氨基酸序列,人工合成了全长168bp(含有转录起始位点ATG以及终止子TAA)Brazzein甜蛋白基因,并克隆至pMD18-Teasy vector上.测序结果表明所获得的基因与Brazzein甜蛋白基因序列完全相符;同时从番茄中克隆果实特异表达启动子pE8,构建番茄果实特异表达载体pB
对不结球白菜细胞质雄性不育系及其保持系DNA进行RAPD分析,在其不育系中获得了两条稳定扩增的片段OPAX1和OPAF12,序列测定结果证明OPAX1DNA序列全长为773bp,其碱基组成为A+T=54.20﹪,A+G=42.69﹪.序列中含有多个起始和终止密码子,推断可以编码含9~74个氨基酸残基的9个多肽片段.通过序列查询发现它与已报道序列的同源性均很低,表明该片段为新发现的不结球白菜DNA序
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