【摘 要】
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目的：本研究主要是讨论在活化的大鼠肝星形细胞系(HSC-T6)中,吡非尼酮对HSC-T6细胞周期、增殖、HSP47及胶原蛋白I表达的影响.方法：(1)细胞培养:大鼠HSC-T6细胞株培养在含10％胎牛
【机 构】
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贵阳医学院附属医院影像科 550004
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目的：本研究主要是讨论在活化的大鼠肝星形细胞系(HSC-T6)中,吡非尼酮对HSC-T6细胞周期、增殖、HSP47及胶原蛋白I表达的影响.方法：(1)细胞培养:大鼠HSC-T6细胞株培养在含10％胎牛血清,100 IU/ml青霉素及100 IU/ml链霉素的DMEM/F12 培养基中,并培养于37℃含5％CO2 的培养箱中.当细胞生长并达到80％融合时,用0.25％胰酶消化吹打制成单细胞悬液并传代,传至2～3代后,用于实验.(2)吡非尼酮作用于HSC-T6后，观察倒置显微镜下细胞形态的变化;(3)吡非尼酮作用于HSC-T6后，CCK-8法检测细胞增殖的变化;(4)吡非尼酮作用于HSC-T6细胞后，流式细胞术观察细胞周期的改变;(5)免疫印迹法(Western Blot)检测毗非尼酮对HSP47蛋白表达的影响;(6)聚合酶链式反应(PCR)检测毗非尼酮作用后胶原I表达的变化;(7)统计分析采用SPSS17.0软件进行，扫描条带用KONTRON IBAS 2.0全自动图像分析系统进行半定量分析。结论：(1)吡非尼酮作用HSC-T624h后，细胞形态发生改变;(2)吡非尼酮作用HSC-T6 24 h后，抑制细胞增殖，并具有浓度依赖性;(3)吡非尼酮对HSC-T6细胞的细胞周期影响具有浓度依赖性，吡非尼酮为100μM并作用于细胞24 h后，G1期明显缩短(P<0.05)。(4)吡非尼酮抑制HSC-T6中HSP47蛋白的表达和Collagen I mRNA的合成，并具有浓度依赖性。
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