【摘 要】
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目的 前期的研究已经证实合成的新型神经营养因子TAT—BDNF通过静脉注射能有效透过大鼠的血脑屏障,本研究旨在探讨TAT—BDNF对胚胎干细胞分化(embryonic stem cell, ESCs
【出 处】
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2010广东省医学会骨科年会暨岭南骨科学术大会
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目的 前期的研究已经证实合成的新型神经营养因子TAT—BDNF通过静脉注射能有效透过大鼠的血脑屏障,本研究旨在探讨TAT—BDNF对胚胎干细胞分化(embryonic stem cell, ESCs)的影响,为进一步TAT—BDNF联合干细胞移植治疗脊髓损伤提供实验依据.方法 体外培养的胚胎干细胞E14株在无LIF和滋养层小鼠胚胎纤维母细胞(MEF)的培养条件下4d后形成拟胚体,采用胚胎特异性抗原SSEA—1抗体进行免疫组化检测.继而用1 umol/L RA初步诱导4d后,在DF12/N2条件培养基中加入TAT—BDNF或者BDNF继续诱导分化7d、14d、21d.使用酪氨酸羟化酶的抗体(anti-TH,标记多巴胺能的神经元)、谷氨酸脱羧酶的抗体(anti-GAD,标记GABA能的神经元)以及anti-NF200(际记成熟神经元中神经纤维)抗体,通过免疫荧光染色观察分析TAT—BDNF对胚胎干细胞向神经细胞分化的影响.
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