狂犬病毒RT-PCR诊断方法的建立及初步研究

• 作 者: 郭玲[1]李泽良[2]杨绍林[1]陈世界[3]杨晓农[4]王成东[5]潘海波[1]刘丹[1]刘杰[1]李乡城[1]舒蕾[1]郭万柱[1]颜其贵[6]
• 机 构: 四川农业大学动物医学院 四川,雅安625014
• 出 处: 四川省畜牧兽医学会2012年学术年会
• 发表日期: 2012年期

　　目的：建立RT-PCR方法，用于检测可疑犬只唾液中的狂犬病毒，为狂犬病的快速诊断提供技术支持。方法：根据GenBank中登录的狂犬病毒(RV)N基因序列，设计合成一对特异性引物，以RV弱毒株Flury-HEP为模板，建立了一种快速检测RV的RT-PCR检测方法，并应用于RV诊断。结果：以此对引物进行PCR扩增能得到与理论设计值大小一致的342bp的特异性条带，犬瘟热病毒(CPV)、犬细小病毒(CPV)、犬冠状病毒(CCV)、腺病毒(CAV)扩增结果均为阴性；最低可检出约1.3pg的病毒核酸；重复性试验结果表明，其检测重复性好，对77份犬唾液标本及64份大熊猫粪便样品用所建立的RT-PCR方法检测，检测到1例大熊猫样品为阳性。结论：建立的RT-PCR检测法，特异性强，敏感度高，重复性和稳定性均好，结果可靠，值得推广应用。