小金丹对三阴性乳腺癌转移的抑制作用及其机制研究

来源 :2017年中国药学大会暨第十七届中国药师周 | 被引量 : 0次 | 上传用户:NSWDAR
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  目的:研究小金丹对三阴性乳腺癌细胞侵袭和转移的影响及其作用机制.方法:选择高转移性三阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-453 和小鼠乳腺癌细胞株4T1,体外实验中用不同浓度的小金丹提取物(25、50、100、150、200 mg生药·L-1)处理细胞24h 后,分别采用肿瘤细胞黏附实验、划痕实验和Transwell 侵袭实验检测细胞黏附、运动、侵袭能力;体内实验采用乳房垫内注射制备原位接种自发转移模型,分别采用0.5、1、2g 生药·kg-1 灌胃给予动物,连续6周,观察乳腺癌在组织器官内的转移情况;Western blotting 法检测细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)相关蛋白和MAPK 通路蛋白的表达水平.结果:划痕实验结果 显示,与对照组相比,25-200 mg 生药·L-1 小金丹提取物作用24h 后能明显抑制乳腺癌MDA-MB-453 细胞的运动能力(P<0.01),作用呈现剂量依赖性关系(r=-0.9724,P<0.01).Transwell 小室实验显示,50-150 mg 生药·L-1 小金丹提取物作用24h 后能明显抑制乳腺癌MDA-MB-453 细胞侵袭能力(p<0.01),细胞侵袭抑制率分别为21.2%,31.6%和44.3%,作用呈现剂量依赖性关系(r=0.9984,P<0.01).细胞黏附实验显示,50-200 mg 生药·L-1 小金丹提取物对乳腺癌MDA-MB-453 细胞的黏附作用未见显著影响.连续给予0.5-2g 生药·kg-1 小金丹 6 周能明显抑制荷瘤动物瘤体积、瘤重和肺转移结节数,且作用呈现剂量依赖性.通过Western blotting 分析发现,50-150 mg 生药·L-1 小金丹提取物能逆转乳腺癌细胞EMT,主要表现在上皮性标志物ZO-1和β-catenin 表达增加,间质性标志物Vimentin 表达降低;进一步分析显示,小金丹能明显抑制p-JNK 和p-p38 的蛋白表达水平,对p-ERK 的表达未见显著影响.结论:小金丹能有效地抑制高转移性乳腺癌细胞的运动和侵袭能力,作用机制可能与其调控p38 MAPK 和JNK MAPK 通路,逆转肿瘤细胞EMT 有关.
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