论文部分内容阅读
目的：利用生物信息学分析和分子克隆技术获得并筛选嗜吞噬细胞无形体的优势诊断表位抗原，在此基础上建立酶联免疫检测方法，并初步应用于实验室感染动物的抗体检测。方法：BioSun生物学软件预测抗原的B细胞表位，分片段克隆表达优势表位区段，采用变性条件镍亲和层析纯化抗原。利用蛋白芯片和ELISA法筛选上述表位抗原，在此基础上建立间接ELISA方法，检测感染鼠和感染绵羊的系列血清的IgG抗体。结果：根据BioSun生物学软件预测嗜吞噬细胞无形体表而抗原的B细胞表位结果，分片段克隆表达优势表位区段，获得高纯度的重组表位抗原，根据蛋白芯片和ELISA法筛选获得与实验室感染动物血清中的IgG反应良好的表位抗原数个，在此摹础上建立间接ELISA方法，检测实验室感染绵羊的系列血清(0-8周)，能较好反映IgG的消长关系(2-3周到达高峰，8周降低到免疫前水平)。结论：筛选获得的基因工程重组优势诊断表位抗原，与实验室感染动物血清中的IgG反应良好，初步结果表明建立的酶联免疫检测方法检测血清抗体显示了良好的应用前景。