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注意缺陷多动障碍(ADHD)是一种常见的神经发育障碍,全基因组关联研究发现MICALL2基因可能是ADHD 的易感基因.本研究在斑马鱼中探讨其同源基因Micall2b 功能异常是否模拟ADHD 表型,并研究临床治疗药物托莫西汀对斑马鱼异常鱼系多动/冲动行为的改善作用.研究使用北京大学生命科学学院斑马鱼水体实验室提供的Tübingen 品系斑马鱼(wild type,WT),针对Micall2b 基因exon2/intron2 结合处设计morpholino oligonucleotide(MO)抑制转录后剪接,对照为包含5 个错配碱基的寡核苷酸片段(以下简称为MIS).在斑马鱼胚胎单细胞期分别注射1nl MO 和MIS,在胚胎发育的3dpf 检测MICALL2b 表达改变.在6dpf 分析幼鱼的运动活动,将注射MO 后分别培养于E2 和四个剂量托莫西汀(5uM,10uM,15uM,20uM)的幼鱼以及注射MIS 者置于48 孔板,每孔一条鱼,8 孔一组,所有由于在观测孔内适应10 分钟,使用Danio Vision 追踪系统(Noldus)记录幼鱼15 分钟内游泳的距离和平均速度,使用Ethovision 10.0 和 GraphPad Prism 5 进行数据分析.基因表达水平分析发现在胚胎发育第三天注射MO 组MICALL2b 表达较control 组(MIS 组和WT 组)明显降低.在胚胎发育第六天MO 组比MIS 组幼鱼在15 分钟内游泳的距离长(1343.00±87.73 mm in MO vs 875.60±76.44 mm in MIS,P=0.0001)、速度快(2.716±0.1038 mm/s in MO vs 2.325±0.1093 mm/s in control,P=0.01).使用不同浓度托莫西汀处理后,MO 幼鱼总游泳距离和平均速度均明显降低(MO E2 vs MO 5uM TX,MO 10uM TX,MO 15uM TX,MO 20uM TX：游泳距离,1343±87.73 mm vs.717.9±97.89 mm,590.8±80.31,479.7±70.01 mm,506.9±73.41mm,P＜0.0001；平均速度,2.716±0.1038 mm/s,vs.1.802±0.1817 mm/s,1.529±0.1676 mm/s,1.182±0.2572 mm/s,1.106±0.1307 mm/s,P＜0.0001),行为指标与托莫西汀浓度呈现负相关.本研究提示在斑马鱼降低MICALL2b 基因表达可产生多动-冲动样行为,该行为能被临床ADHD 治疗药物托莫西汀缓解.