【摘 要】
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目的：为研究人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植后对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肝细胞生长因子(HGF)、沉默信息调节因子1(SIRT-1)、周期性蛋白依赖性
【机 构】
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内蒙古农业大学 兽医学院 动物组织胚胎学与发育生物学实验室,呼和浩特 010018
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十八次学术研讨会
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目的：为研究人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植后对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肝细胞生长因子(HGF)、沉默信息调节因子1(SIRT-1)、周期性蛋白依赖性激酶抑制因子(p27kip1)mRNA及其蛋白表达的影响,探索人羊膜间充质干细胞治疗肝损伤的作用机制.
方法：采用胰蛋白酶-胶原酶消化法从羊膜组织中分离间充质干细胞,通过流式细胞术和免疫荧光等方法进行鉴定.模型组按浓度为20μl/g剂量的四氯化碳和橄榄油混合液诱导小鼠肝纤维化,治疗组经小鼠尾静脉注射人羊膜间充质干细胞约1×106个/ml.分别取模型组和细胞移植的治疗组小鼠肝组织采用实时荧光定量RT-PCR和Western blot法检测人羊膜间充质干细胞移植前后HGF、SIRT-1、α-SMA、P27kip1mRNA相对表达量及其蛋白表达情况.
结果：从羊膜中分离得到纯度较高的间充质干细胞,免疫荧光检测表面标记波形丝蛋白(Vimentin)和阶段特异表达抗原4(SSEA-4)均呈阳性;hAMSCs表达CD29、CD49d、CD73表面抗原,不表达骨髓间充质表面抗原CD34、CD45和人类白细胞抗原DR位点(HLA-DR);经实时荧光定量RT-PCR和Western blot检测发现治疗组HGF和SIRT-1 mRNA表达量显著高于模型组;而α-SMA和P27kip1rnRNA和蛋白表达量明显低于模型组.
结论：人羊膜间充质干细胞可以改善四氯化碳诱导产生的肝纤维化,抑制肝细胞凋亡,促进肝细胞有丝分裂,对肝损伤有一定的修复作用,为组织工程和再生医学的临床应用提供实验基础.
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