【摘 要】
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目的：为了进一步研究A型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用。 方法：本研究采用RT-PCR技术分别扩增A/Swine/Guangdong/LM2/05(H1N1)、A/Chicken/Guangdong/W2/04(H5N1)流感
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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目的：为了进一步研究A型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用。
方法：本研究采用RT-PCR技术分别扩增A/Swine/Guangdong/LM2/05(H1N1)、A/Chicken/Guangdong/W2/04(H5N1)流感病毒的NP基因,分别将其克隆到原核表达载体pET30(a)上,在大肠杆菌中进行诱导表达。
结果：SDS-PAGE和Western-Blotting检测表明:H1N1亚型猪流感病毒NP蛋白得到表达,并且能分别与H1N1和H5N1亚型流感病毒的鼠高免血清发生特异性反应,具有良好的反应活性；而H5N1亚型禽流感病毒的重组NP蛋白未获得表达。
结论：为以NP蛋白为诊断抗原的诊断试剂的开发、ELISA诊断方法的建立、及蛋白功能的研究奠定了基础；本结果同时说明不同毒株的NP蛋白在大肠杆菌中的表达具有一定差异性。
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