【摘 要】
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目的:探讨磷脂酰肌醇-3激酶-核因子E2相关因子2(PI3K/Nrf2)信号通路在内毒素休克兔急性肾损伤中的作用.方法:健康清洁级雄性新西兰大白兔50只,2月龄,体重1.5~2.0kg,随机分为
【机 构】
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天津医科大学南开临床学院,天津市南开医院麻醉科 300310
【出 处】
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中国中西医结合麻醉学会年会暨第二届全国中西医结合麻醉学术研讨会
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目的:探讨磷脂酰肌醇-3激酶-核因子E2相关因子2(PI3K/Nrf2)信号通路在内毒素休克兔急性肾损伤中的作用.方法:健康清洁级雄性新西兰大白兔50只,2月龄,体重1.5~2.0kg,随机分为5组(n=10):对照组(C组)、内毒素休克模型组(L组)、渥曼青霉素+内毒素休克组(WL组)、渥曼青霉素组(wortmannin)(W组)、二甲基亚砜(DMSO)组(D组).实验兔经耳缘静脉注射20%乌拉坦(5ml/kg)麻醉后,W组、WL组经耳缘静脉注射wortmannin0.6mg/kg(溶剂为DMSO 0.08ml/kg),D组注射DMS0 0.08ml/kg,C组、L组注射等量生理盐水.30分钟后,L组、WL组静脉注射脂多糖(LPS)5mg/kg(溶于2ml生理盐水),C组、W组和D组注射等容量生理盐水.注射LPS或生理盐水后6小时留取血清和尿标本,处死动物,留取肾脏.采用苏木素伊红(HE)染色法,电镜下观察肾组织病理学改变并进行肾组织损伤评分(HSK);全自动生化仪测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和尿α1-微球蛋白(α1-MG)浓度;硫代巴比妥酸法测定肾组织丙二醛(MDA)含量;黄嘌呤氧化酶法测定肾组织超氧化物岐化酶(SOD)活性;RT-PCR法检测肾组织Nrf2mRNA及HO-1mRNA表达水平;Western blot法检测肾组织p-Akt蛋白、Nrf2总蛋白、Nrf2核蛋白及HO-1蛋白的表达水平.结果:与C组、W组及D组比较,L组、WL组肾组织HSK、血清BUN及Cr浓度、尿α1-MG浓度及肾组织MDA含量升高,SOD活性降低,肾组织Nrf2mRNA、HO-1mRNA、p-Akt蛋白、Nrf2总蛋白、Nrf2核蛋白及HO-1蛋白表达上调(P<0.05).C组、W组、D组之间上述指标差异无统计学意义(P>0.05).与L组比较,WL组肾HSK、血清BUN及Cr浓度、尿α1-MG浓度及肾组织MDA含量升高,SOD活性降低,肾组织Nrf2mRNA、HO-1mRNA、p-Akt蛋白、Nrf2总蛋白、Nrf2核蛋白及HO-1蛋白表达下调(P<0.05).结论:PI3K/Nrf2通路激活是内毒素休克诱发兔急性肾损伤时机体的适应性调节反应机制之一.HO-1作为PI3K/Nrf2激活后的效应蛋白,可能是PI3K/Nrf2通路介导内毒素性急性肾损伤保护作用的机制之一.
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