【摘 要】
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目的:探索地黄有效活性成分梓醇抗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的作用及其机制.方法:在整体动物和细胞水平,探索梓醇对DN的保护作用及其可能机制.实验共分为两个部分:①采用高脂饲料喂养联合小剂量腹腔注射链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法建立DN动物模型,将150只雄性SD大鼠随机分为普通饲料饮食组(n=20)和高脂饲料饮食组(n=130),各组动物
【出 处】
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中华中医药学会第十次中药实验药理学术会议
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目的:探索地黄有效活性成分梓醇抗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的作用及其机制.方法:在整体动物和细胞水平,探索梓醇对DN的保护作用及其可能机制.实验共分为两个部分:①采用高脂饲料喂养联合小剂量腹腔注射链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法建立DN动物模型,将150只雄性SD大鼠随机分为普通饲料饮食组(n=20)和高脂饲料饮食组(n=130),各组动物予以相应饲料喂养持续4周.4周后,高脂饲料饮食组SD大鼠腹腔注射1％ STZ溶液35mg/kg,制备糖尿病(diabetic mellitus,DM)动物模型,普通饲料饮食组动物腹腔注射等容量的柠檬酸缓冲液,72h和2周后,分别测量实验动物的随机血糖值(RBG),两次RBG均≥16.7mmol/L视为稳定的DM模型.将55只DM大鼠随机分为5组,每组11只:DM组,DM+二甲双胍组(200mg/kg),DM+梓醇低剂量组(30mg/kg),DM+梓醇中剂量组(60mg/kg)和DM+梓醇高剂量组(120mg/kg).正常血糖大鼠随机分为2组,每组10只:正常对照组,正常+梓醇对照组(60mg/kg).各给药组i.g相应药物,正常组和DM组i.g蒸馏水,每日一次,连续10周后,测定大鼠血糖,血清胰岛素,肾脏质量指数,肾功能指标,肾皮质转化生长因子-β 1 (TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、血管紧张素Ⅱ (Ang Ⅱ)、超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原浓度(Col Ⅳ).病理形态学检测:肾皮质病理切片,PAS染色观察肾小球细胞外基质(ECM)的表达量.RT-PCR法测定肾皮质TGF-β 1和CTGF mRNA的表达量.②高糖培养环境下,观察不同浓度梓醇对肾小球系膜细胞增殖性,细胞内活性氧(ROS)浓度,FN,Col Ⅳ和层粘连蛋白(LN)分泌量的影响.Western blot法分别检测梓醇对高糖刺激下TGF-β 1的表达量,及对TGF-β 1诱导下smad2/3磷酸化程度的干预作用.
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