【摘 要】
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目的 观察芝麻素对多柔比星致H9C2细胞损伤的保护作用及Sirt1及Mn-SOD在其中的作用.方法 采用H9C2细胞,多柔比星2 μmol·L-1孵育24 h造成多柔比星细胞损伤模型.MTT法测定细胞存活率.分别利用DCFH及RH123荧光探针测定细胞ROS及膜电位水平.生化法测定Mn-SOD活性.Western蛋白质印迹法检测Mn-SOD蛋白含量.结果 与对照组相比,多柔比星2 μmol·L-1
【机 构】
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河北医科大学公卫学院毒理学教研室,河北石家庄050017 河北医科大学基础医学院药理学教研室,河北
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目的 观察芝麻素对多柔比星致H9C2细胞损伤的保护作用及Sirt1及Mn-SOD在其中的作用.方法 采用H9C2细胞,多柔比星2 μmol·L-1孵育24 h造成多柔比星细胞损伤模型.MTT法测定细胞存活率.分别利用DCFH及RH123荧光探针测定细胞ROS及膜电位水平.生化法测定Mn-SOD活性.Western蛋白质印迹法检测Mn-SOD蛋白含量.结果 与对照组相比,多柔比星2 μmol·L-1孵育24 h细胞存活率下降约40%.预先孵育芝麻素40 μmol·L-124 h后再给予多柔比星2 μmol·L-1可使细胞存活率明显增加约15%;与多柔比星组相比,具有统计学差异(P<0.01).H9C2细胞多柔比星2 μmolL-1孵育24 h细胞ROS水平明显升高,线粒体膜电位明显降低,提示多柔比星引起细胞氧化应激水平增强及线粒体损伤.预先孵育芝麻素40 μmol· L-1 24 h可明显减弱多柔比星引起的ROS增加及膜电位水平的下降,具有统计学差异(P<0.01),提示芝麻素可降低多柔比星对细胞的氧化应激损伤.H9C2细胞单独孵育芝麻素40 μmol·L-1 24 h可增强Mn-SOD的活性和上调Mn-SOD的蛋白表达.单纯给予多柔比星可减低MnSOD的活性和降低Mn-SOD的蛋白表达,但预先孵育芝麻素40 μmol·L-1可拮抗多柔比星对Mn-SOD活性及蛋白表达的作用.预先孵育尼克酰胺(20 mmol·L-1),Sirt1抑制剂,可部分拮抗芝麻素对多柔比星所引起的细胞存活率、ROS及膜电位水平的改变,并且可取消芝麻素对Mn-SOD活性和表达的改变.提示Sirt1可能通过上调Mn-SOD参与了芝麻素对多柔比星细胞损伤保护作用.结论 芝麻素可对抗多柔比星引起的H9C2细胞氧化应激损伤,其机制之一可能是芝麻素通过Sirt1上调Mn-SOD从而拮抗多柔比星的细胞损伤作用.
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