【摘 要】
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本研究采用重氮化-偶联法将磺胺嘧啶(SD)与人血清白蛋白(HSA)相连制备了免疫抗原SD-HSA,与卵清白蛋白(OVA)相连制备了包被抗原SD-OVA,用过碘酸钠法将SD-OVA与辣根过氧化物酶(HRP)连接制备了酶标抗原(SD-OVA-HRP).用SD-HSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化制备了单克隆抗体,利用单抗建立了直接竞争ELISA方法:在1ng/mL-729 ng/mL浓度范
【机 构】
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华中农业大学兽医微生物与免疫学实验室,武汉,430070
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会
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本研究采用重氮化-偶联法将磺胺嘧啶(SD)与人血清白蛋白(HSA)相连制备了免疫抗原SD-HSA,与卵清白蛋白(OVA)相连制备了包被抗原SD-OVA,用过碘酸钠法将SD-OVA与辣根过氧化物酶(HRP)连接制备了酶标抗原(SD-OVA-HRP).用SD-HSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化制备了单克隆抗体,利用单抗建立了直接竞争ELISA方法:在1ng/mL-729 ng/mL浓度范围标准曲线方程y=12.05x+2.2538,线性相关系数R2=0.995,IC50为41.7ng/mL.与磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺对甲氧嘧啶(SMD)、磺胺二甲氧嘧啶(SDM)、磺胺二甲嘧啶(SM2)、磺胺喹噁啉(SQ)及磺胺甲噁唑(SMZ)的交叉反应率分别为:1.7％、3.1％、＜0.01％、＜0.01％、＜0.01％、3.4％.在猪肉、鸡肉和鸡肝中定量限为20 μg/kg,回收率70％-110％,批间变异系数＜26％;在牛奶定量限为5μg/kg,回收率60％-120％,批间变异系数＜32％.
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