【摘 要】
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根据沙门氏菌编码侵袭蛋白E(invasion protean E,invE)的基因设计一对引物,对7株沙门氏菌和10株非沙门氏菌进行聚合酶链反应(PCR)扩增,结果沙门氏菌均出现463bp的特异性扩增条带,所有非沙门氏菌均未扩增出目的条带,提示这对引物的特异性较好.PCR结果显示,该方法能检测出3.0 × 102 cfu/mL纯培养的沙门氏菌,4种人工染菌食品的模拟检测结果显示,当各食品中初始含菌
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会
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根据沙门氏菌编码侵袭蛋白E(invasion protean E,invE)的基因设计一对引物,对7株沙门氏菌和10株非沙门氏菌进行聚合酶链反应(PCR)扩增,结果沙门氏菌均出现463bp的特异性扩增条带,所有非沙门氏菌均未扩增出目的条带,提示这对引物的特异性较好.PCR结果显示,该方法能检测出3.0 × 102 cfu/mL纯培养的沙门氏菌,4种人工染菌食品的模拟检测结果显示,当各食品中初始含菌量分别为1.5cfu/g(火腿肠)、2.4cfu/g(鲜猪肉)、1cfu/ml(包装鲜奶)和1cfu/g(鲜鸡蛋)时,分别经过6h、18h、12h和18h增菌,PCR检测为阳性,而阴性对照组均为阴性.实验结果说明该方法具有耗时少,特异性强,灵敏度高,操作简便,费用低的优点,值得推广和应用.
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从山东某猪场送检的疑似猪支原体肺炎的病猪中用Friss培养基进行了猪肺炎支原体的分离,并对分离菌株进行了PCR鉴定和P46基因的克隆和序列分析,同时对培养物倍比稀释后进行了PCR扩增.结果成功分离到一株猪肺炎支原体,其P46基因核苷酸同源性与J株的同源性最高,为98.47%,将培养物稀到10-5倍后,取500μL提取DNA进行PCR扩增,结果为阳性,从而充分地证明了该分离产物就是猪肺炎支原体.
目的:建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)1型与5型差减文库,克隆差异表达基因并分析筛选不同血清型间免疫保护相关基因.方法:采用cDNA代表性差异分析法(cDNARDA),通过三轮消减杂交后获得特异性差异表达基因,克隆入PGEM-T载体,建立差减基因文库,随机挑选120个克隆子进行测序,获得的不同的差异表达基因序列,应用DNAMAN软件进行差异基因序列分析.经DNA印迹证实后,采用Interne
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