【摘 要】
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将H1亚型猪流感病毒的血凝素(HA)基因克隆到pFastBacGP67A载体上,经酶切鉴定及测序筛选出阳性重组质粒后,转化DH10Bac感受态细胞与杆状病毒转移载体(bacmid)进行转座,通过蓝
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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将H1亚型猪流感病毒的血凝素(HA)基因克隆到pFastBacGP67A载体上,经酶切鉴定及测序筛选出阳性重组质粒后,转化DH10Bac感受态细胞与杆状病毒转移载体(bacmid)进行转座,通过蓝白斑筛选获得重组杆状病毒穿梭载体,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,经过三轮蚀斑纯化,获得重组杆状病毒rHA,再感染细胞,超声收获HA蛋白。通过血凝和血凝抑制、免疫印迹法、ELISA分析表明该蛋白得到表达,且具有与天然蛋白相似的生物活性,为研制猪流感病毒基因工程亚单位疫苗奠定基础,也可通过所表达的蛋白来研制猪流感ELISA检测试剂盒来做猪流感血清流行病学调查,为防控流感大流行提供参考。
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