【摘 要】
：
目的：骨髓来源的干细胞有分化成为肾小球系膜细胞的潜能，从而成为肾损伤组织修复的细胞来源。本实验目的是国外学者的研究基础上，进一步证实体外诱导骨髓干细胞向系膜细胞分化的潜能，并初步探讨其诱导分化的机制。方法：利用差异贴壁法获取SD大鼠骨髓干细胞，培养增殖，用血小板源生长因子(platelet—derived growth factor-BB，PDGF-BB)对骨髓干细胞进行体外诱导，7天后观察细胞生
【机 构】
：
北京协和医学院北京协和医院儿科 100730 北京协和医学院北京协和医院基本外科
【出 处】
：
中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会
论文部分内容阅读
目的：骨髓来源的干细胞有分化成为肾小球系膜细胞的潜能，从而成为肾损伤组织修复的细胞来源。本实验目的是国外学者的研究基础上，进一步证实体外诱导骨髓干细胞向系膜细胞分化的潜能，并初步探讨其诱导分化的机制。
方法：利用差异贴壁法获取SD大鼠骨髓干细胞，培养增殖，用血小板源生长因子(platelet—derived growth factor-BB，PDGF-BB)对骨髓干细胞进行体外诱导，7天后观察细胞生长情况，并对其进行形态、系膜细胞特异表达分子、以及功能学鉴定。在诱导分化模型中加入ERK活化阻断剂PD98059，观察细胞生长及特异性分子的表达情况。
结果：在含PDGF—BB的分化培养基作用下，呈梭形漩涡状排列的骨髓干细胞经7天的诱导，逐渐分化为多角形的系膜细胞样细胞，对照组的骨髓干细胞仍保持长梭形漩涡状的干细胞外观。诱导分化组细胞系膜细胞特异的α—Actin及Desmin分子免疫荧光染色呈阳性，且Ⅷ因子染色呈阴性。诱导分化组细胞在mRNA水平上，其系膜细胞特异的Desmin、α—Actin及Thy-1分子及PDGF受体表达水平明显高于对照组，且抑制分化组细胞此类分子的表达与对照组无显著差异。在经诱导分化7天的细胞中，加入血管紧张素Ⅱ后，出现明显的细胞收缩反应。
结论：基本建立以PDGF-BB为主的诱导分化体系，诱导大鼠骨髓干细胞分化为肾小球系膜细胞样细胞，此诱导分化机制可能是通过MAPK/ERK1/2信号途径介导的。
其他文献
目的：通过建立EB病毒(Epstein-Barr Virus，EBV)感染单核细胞和树突状细胞(dendritic cell，DC)的培养体系，研究脐带血单核细胞和DC的EBV相关蛋白的表达，探讨EBV对脐带血DC分化和功能的影响，并且与相同培养条件下成人外周血单核细胞和DC比较。以期从抗原提呈细胞这一免疫应答的起始环节，来阐明EBV逃逸宿主免疫监视的可能机制，为临床防治EBV感染提供理论和实验依
目的：探讨儿童慢性肉芽肿(Chronic Granulomatous Disease，CGD)临床特点和治疗方法。方法：根据临床表现和二氢若丹明分析中性粒细胞吞噬氧化功能诊断CGD。对经上述方法诊断的病例进行随访治疗。分析其临床特点及治疗效果。结果：6例CGD患儿均为男性，确诊年龄3个月～7岁。5例患儿母亲DHR分析，2例母亲为携带者。反复感染是CGD最常见的表现，也是关系到患者预后的主要方面。感
目的：诺若病毒属人类杯状病毒，是人类暴发性腹泻的最常见病毒，也是小儿急性散发性腹泻的主要病原体之一，但目前尚缺乏更详细的小儿诺若病毒感染的分子流行病学资料。本研究通过建立检测诺若病毒的方法，对2001～2005年间上海地区住院腹泻小儿进行诺若病毒的监测，并对流行株进行基因序列的测定，以帮助我们充分了解诺若病毒在上海地区的流行特征，为该病原体所致疾病的防治提供基础数据和理论依据。方法：收集2001～
背景及目的：儿科严重脓毒症(sepsis)和脓毒性休克(septic shock)仍处于高发病率、高病死率状态。前炎症细胞因子TNF-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)是脓毒症和脓毒性休克发病的重要介质，巨噬细胞是脓毒症TNF-α产生的主要来源。P38 MAPK(mitogen-activated protein kinases)在TNF-α信号传导通路中占据重要地位
目的：研究HIV-1感染者不同时期分离的R5毒株的生物学特性。方法：采用传统的共培养方法分离并培养HIV-1，用表达CD4和趋化因子受体CCR5或CXCR4的GHOST-细胞系，测定病毒辅助受体的利用和感染性，从而判断所分离毒株的CCR5嗜型(R5型毒株)；使用2ng的P24病毒量感染正常人分离的外周血单个核细胞(PBMCs)，ELISA法检测第1、3、5、7、10、15天的HIV-1 P24值，
目的：观察微囊化肝细胞移植对暴发性肝衰竭(Folminanthepaticfaihtre，FHF)大鼠的疗效。方法：1.微囊化大鼠肝细胞的制备seglcn改良二步胰酶灌注法从SD大鼠肝脏进行肝细胞分离及纯化，所得肝细胞悬液在血细胞计数板上作细胞计数，用0.4％台盼蓝染色判断细胞产量及活率。肝细胞与2.0％海藻酸钠混匀，在自制装置下制备微囊化肝细胞并观察形态学特征。2.将雄性成年SD大鼠随机分为正常
目的：了解儿科产质粒介导AmpCβ内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药性及分子流行病学情况。方法：收集128株(包括97株肺炎克雷伯菌和31株大肠埃希菌)AmpC酶表型鉴定试验阳性的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌，采用多重及全长聚合酶链反应(PCR)进行扩增，全长扩增产物测序后，进行序列分析和网上比对，确定其基因型。基因阳性的菌株再用琼脂稀释法检测其耐药性；采用质粒转移接合试验，确定耐药基因是否在种内或
To gain insight into the later stages of nephrogenesis, we detected the alterations in gene expression in rat kidney at two postnatal stages, P0 (O day after birth), the time at which nephrogensis is
目的：探讨Decorin对TGFFβ1诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响；观察Deeorin对TGFβ1诱导的HK-2细胞I、Ⅲ型胶原表达的影响。方法：将体外培养的HK-2细胞分为6组：A.阴性对照组；B.10ng/ml TGFβ1组：C.10ne/mlDecorin组；D.100ng/ml Decorin组；E.10ng/ml TGFβ1+10ng/mlDecodn组；F.10n
目的：观察低密度脂蛋白受体(LDLr)在阿霉素肾病大鼠发生肾小球硬化过程中的表达变化，探讨脂质介导肾脏损害的部分机制。方法：雄性SD大鼠随机分为正常对照组、阿霉素肾病组(模型组)和阿霉素肾病辛伐他汀治疗组(治疗组)，分别灌胃给药11周，采用RT-PCR和western-blot技术检测LDLr、胆固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)mRNA和蛋白在肾脏的表达，酶比色法和油红染色法检测肾组织内