【摘 要】
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目的：金黄色葡萄球菌(简称金葡菌,SA)是感染人类的常见细菌,通常引起皮肤损伤,严重时危及生命.由于耐药性的产生,金葡感染难以治疗.由于蛋白组学的结果源于细菌蛋白水平的动态变化,对应着细菌生理形态的改变,因此蛋白组学的方法对于我们的研究有着深远的意义.本课题中,我们发现中国的医院获得性金葡菌ST239型和社区获得性金葡菌ST398型在毒力上存在差别,因此我们进一步运用蛋白组学方法对ST239和ST
【机 构】
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医院获得性和社区获得性金葡菌的毒力蛋白通路研究 上海市 200127
【出 处】
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第三届临床微生物学与感染病学国际论坛暨全国微生物与人体健康学术会议
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目的：金黄色葡萄球菌(简称金葡菌,SA)是感染人类的常见细菌,通常引起皮肤损伤,严重时危及生命.由于耐药性的产生,金葡感染难以治疗.由于蛋白组学的结果源于细菌蛋白水平的动态变化,对应着细菌生理形态的改变,因此蛋白组学的方法对于我们的研究有着深远的意义.本课题中,我们发现中国的医院获得性金葡菌ST239型和社区获得性金葡菌ST398型在毒力上存在差别,因此我们进一步运用蛋白组学方法对ST239和ST398的差异蛋白和蛋白通路进行分析,并验证ST239和ST398各自独特蛋白通路是否发挥其不同毒力的主导因子.方法：首先分别选取四株ST239和ST398,通过上皮细胞粘附实验和小鼠持留感染实验比较二者粘附宿主能力的不同,通过小鼠皮肤脓肿实验比较二者毒力不同；通过二维电泳分离以上八株菌蛋白,并进行质谱鉴定,得到二者差异蛋白,String分析得到差异蛋白通路,进一步通过RT-PCR和Western blotting方法验证ST239和ST398各自独特蛋白通路中蛋白的差异.结果：上皮细胞粘附实验发现ST239比ST398更易粘附A549上皮细胞；小鼠持留感染实验发现相同剂量下,ST239感染的小鼠存活能力显著高于ST398感染的小鼠,病理切片结果显示ST239感染的小鼠肾脏和脾脏中存在金葡菌病灶；小鼠皮肤脓肿实验结果显示ST398引起的皮肤脓肿面积显著大于ST239所引起的皮肤脓肿.二者的蛋白组学差异比较发现细胞表面蛋白在ST239中均高表达,而外分泌毒力因子在ST398中均高表达,基于String分析我们构建了细胞表面蛋白调控通路(FnbpA-Spa-Cna-ClfA)和外分泌毒力因子调控通路(AgrA-AgrC-SarX-ModA).分别选取八株ST239和ST398,通过RT-PCR和Western Blotting验证发AgrA-AgrC-SarX-ModA通路蛋白在ST398中的表达均显著高于ST239,而FnbpA-Spa-Can-CIfA通路蛋白在ST239中的表达均显著高于ST398.结论：我们研究表明医院获得性金葡菌ST239在宿主粘附能力上显著强于社区获得性金葡菌ST398,而ST398在外分泌毒力能力上显著强于ST239,造成这种差异的主要原因可能是ST239中显著高表达的细胞表面蛋白通路及ST398中显著高表达的外分泌毒力因子通路.
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