【摘 要】
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体外研究TLR4激活后对于牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)生物学特性的影响及可能的机制.应用10μg/ml浓度的LPS体外刺激PDLSCs,CCK-8法检测其增殖能力;划痕试验检测其迁移能力;体外成骨、成脂诱导,茜素红和油红O染色及定量检测其成骨、成脂分化能力;同时检测分化过程中成骨(ALP、Runx2、Ocn、col I)、成脂(PPA
【机 构】
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第四军医大学口腔医学院牙周粘膜病科,西安市长乐西路145号 710032 第四军医大学组织工程研发
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体外研究TLR4激活后对于牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)生物学特性的影响及可能的机制.应用10μg/ml浓度的LPS体外刺激PDLSCs,CCK-8法检测其增殖能力;划痕试验检测其迁移能力;体外成骨、成脂诱导,茜素红和油红O染色及定量检测其成骨、成脂分化能力;同时检测分化过程中成骨(ALP、Runx2、Ocn、col I)、成脂(PPAR-γ,Leptin,LPL)相关的基因在mRNA,蛋白水平的变化;western blot检测PDLSCs在经LPS刺激后不同时间点NF-κB信号通路的相关蛋白表达水平变化.在成骨分化过程中加入TLR4单克隆抗体或NF-κB通路阻断剂PDTC.研究表明，LPS通过TLR4刺激PDLSCs并导致其NF-κB信号通路激活，并使其成骨能力减弱，成脂能力增强，同时伴随趋化迁移能力减弱。其成骨能力的改变与NF-κB信号通路相关。以上实验说明细菌及其产物也可直接作用于PDLSCs，引起其功能发生变化，该变化可能参与了牙周炎的发生。
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