【摘 要】
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目的：端粒结合蛋白是端粒功能的重要组成部分,在肿瘤细胞的放射抵抗方面也起到了举足轻重的作用.本研究旨在探讨在乳腺癌放抗株中端粒长度、端粒酶活性以及端粒结合蛋白PT
【机 构】
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湖北省肿瘤生物学行为重点实验室,武汉大学中南医院放化疗科
【出 处】
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第九届泛珠江区域放射肿瘤学学术大会暨肿瘤放射治疗多中心协作研讨会、重庆市医学会放射肿瘤治疗学专业委员会2014年会
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目的：端粒结合蛋白是端粒功能的重要组成部分,在肿瘤细胞的放射抵抗方面也起到了举足轻重的作用.本研究旨在探讨在乳腺癌放抗株中端粒长度、端粒酶活性以及端粒结合蛋白PTOP和TRF1之间的相互作用及影响.方法：将乳腺癌MDA-MB-435s细胞分别给予2Gy/次及6Gy/次,总量为60Gy的X线照射建立成稳定的放射抵抗株.运用southern blot技术检测短粒长度,端粒酶Elisa试剂盒检测端粒酶活性,并且在蛋白和基因水平上检测PTOP以及TRF1的变化情况.为了进一步研究PTOP的功能,我们运用慢病毒技术沉默该基因,并且再次检测其对端粒酶活性以及放射抵抗的影响.结果：我们成功建立了2株放射抵抗株,分别是MDA-MB-435s R60/6细胞和MDA-MB-435s R60/2细胞.其中R60/6细胞的端粒长度大约是亲代的2-2.4倍,而R60/2细胞则是亲代的1.3-1.75倍.在放抗株中端粒结合蛋白无论在蛋白还是基因水平都是高表达的,并且端粒酶活性也比亲代细胞更强.与此同时,当我们沉默PTOP基因后,我们发现放抗株的放射抗拒性降低了,并且其端粒酶活性也有部分程度的降低.结论：PTOP和TRF1在乳腺癌放抗株中都是高表达的,尤其是PTOP,它与端粒长度、端粒酶活性之间存在密切的相互影响.
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