【摘 要】
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目的 构建骨关节炎患者硬化区和非硬化区软骨下骨成骨细胞和软骨细胞三维立体培养模型，研究在异常压应力下和非压应力下骨关节炎患者不同病变部位的成骨细胞对软骨细胞的作用.方法 收集行全膝关节置换术的骨关节炎患者术后遗弃的胫骨平台骨组织.应用Ⅰ型胶原酶消化联合贴壁培养方法，培养软骨下骨的成骨细胞，应用Ⅱ型胶原酶消化方法，培养软骨细胞.应用海藻酸钠进行软骨细胞的藻酸盐微珠培养，并通过多孔插入器分别同硬化区和
【机 构】
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上海市杨浦区中心医院同济大学附属杨浦医院 上海市交通大学附属第六人民医院
【出 处】
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第二十届全国中西医结合骨伤科学术研讨会、第二届中国医师协会中西医结合医师分会骨伤科学术年会、第十九届浙江省中西医结合骨伤
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目的 构建骨关节炎患者硬化区和非硬化区软骨下骨成骨细胞和软骨细胞三维立体培养模型，研究在异常压应力下和非压应力下骨关节炎患者不同病变部位的成骨细胞对软骨细胞的作用.方法 收集行全膝关节置换术的骨关节炎患者术后遗弃的胫骨平台骨组织.应用Ⅰ型胶原酶消化联合贴壁培养方法，培养软骨下骨的成骨细胞，应用Ⅱ型胶原酶消化方法，培养软骨细胞.应用海藻酸钠进行软骨细胞的藻酸盐微珠培养，并通过多孔插入器分别同硬化区和非硬化区软骨下骨成骨细胞的单层膜状立体结构进行三维共培养.在不加压和加用异常压应力作用下，应用实时定量RT-PCR技术观察不同病变部位的软骨下骨成骨细胞对软骨细胞的作用.结果 成功构建了软骨细胞的藻酸盐微珠分别同硬化区和非硬化区软骨下骨成骨细胞的单层膜状三维共培养结构.RT-PCR显示，和非硬化区软骨下骨成骨细胞共培养时，软骨细胞Ⅱ型胶原基因的表达量加压时比未加压时表达量明显降低(P＜0.01).和硬化区软骨下骨成骨细胞共培养时，软骨细胞Ⅱ型胶原基因的表达量加压时比未加压时降低(P＜0.05).未加压时和软骨下骨成骨细胞共培养，软骨细胞Ⅱ型胶原基因的表达量，与硬化区共培养的比非硬化区共培养的明显降低(P＜0.01).加压时和软骨下骨成骨细胞共培养，软骨细胞Ⅱ型胶原基因的表达量，与硬化区共培养的比非硬化区共培养的表达量降低(P＜0.05).在和非硬化区软骨下骨成骨细胞共培养的软骨细胞加压时比未加压时AGG基因的表达量表达量明显降低(P＜0.01).在和硬化区软骨下骨成骨细胞共培养的软骨细胞加压时比未加压时AGG基因的表达量明显降低(P＜0.01).未加压时，硬化区比非硬化区软骨下骨成骨细胞共培养的软骨细胞AGG基因的表达量降低(P＜0.05).加压时，硬化区比非硬化区软骨下骨成骨细胞共培养的软骨细胞AGG基因的表达量降低(P＜0.05).结论 成骨细胞生物学表型变化是骨关节炎患者病变的重要特征之一，骨关节炎患者硬化区的成骨细胞促进着软骨细胞的退变.
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