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研究目的：环氧化酶(COX)是花生四烯酸转化为前列腺素的限速酶，有COX-1和COX-2两种同功酶。COX-1是一种结构型酶，起稳定机体功能的作用，如维持正常胃粘膜，肾脏血流和血小板聚集;COX-2是一种诱导型酶，正常生理状态下，COX-2存在于部分肾脏和脑组织中。在炎症、生长因子、致瘤基因、脂多糖和肿瘤促进剂刺激时，COX-2过度表达。近年来国外诸多研究表明，COX-2不仅是启动炎症反应的关键酶，而且还可通过多种致病机制参与肿瘤的发生和发展过程，因此可以作为预防、治疗肿瘤的靶分子。通过大鼠结肠癌模型及临床试验结果表明，对预防和治疗结肠癌，COX-2是一个非常有用的靶点。通过对其他脏器上皮癌，如乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌的研究，COX-2在这些肿瘤的发病机理上起着重要的作用。最近报告证明，服用非甾体抗炎药物(NSAIDs)的妇女患乳腺癌的风险减少，且患乳腺癌的风险随着NSAIDs服用剂量的增加而降低。
流行病学显示:日常生活中经常摄人鱼油的人群，乳腺癌发病率较低，与鱼油成分中所含3-n降低花生四烯酸的水平，下调COX-2的表达有关。同时通过大鼠乳腺癌模型及人类乳腺癌的研究证明，在人类转移性乳腺癌的发病机制中，COX-2过表达起着重要的作用。磷脂酶(PLA2)是花生四烯酸代谢的另一个关键酶，主要通过催化花生四烯酸及其代谢产物的释放参与调节细胞增殖。有研究报道，cPLA2的活性和表达在人结肠癌、胃癌和肝细胞癌中增高，这提示cPLA2与肿瘤发生相关，可能在细胞生长增殖中发挥重要作用。随着对PLA2家族认识的加深。人们发现cPLA2作为花生四烯酸生成的特异性关键酶，cPLA2在细胞增殖中的作用日益受到重视。
因此，本研究通过检测乳腺癌组织中的COX-2、cPLA2表达情况及其与患者临床病理特征之间的关系，探讨二者在乳腺癌发生发展过程中的作用，并为将来COX-2抑制剂在临床上用来预防和治疗乳腺癌提供依据。
实验方法：本实验搜集经病理证实的乳腺癌组织61例及乳腺腺病组织15例，人选病例均为女性，发病年龄范围36～69岁，发生淋巴结转移者34例。根据临床分期，乳腺癌Ⅰ期患者为8例，Ⅱ期患者为23例，Ⅲ期患者18例，Ⅳ期患者12例。所有患者术前未经任何抗癌治疗。标本取材后用10％中性福尔马林固定，石蜡包埋制成3μm切片，用于免疫组化染色。选用兔抗人COX-2多克隆抗体及SP免疫组化试剂盒和DAB显色剂，采用链霉素亲生物索一过氧化酶免疫组织化学方法检测COX-2及ePLA2在乳腺癌组织和腺病组织的表达情况。并分析乳腺癌组织中COX-2，cPLA2的表达强度与患者对应的各项临床病理特征之间的关系。免疫组化方法简述如下：
石蜡切片常规脱蜡、梯度水化后，蛋白酶K抗原修复，PBS冲洗3次，3％H2O2室温孵育，以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗片3次，每次5min。封闭液覆盖标本，室温30 min，不清洗。加一抗(1：100稀释)，4℃过夜，PBS洗片3次，每次5min。加二抗室温30 rain，PBS洗片3次，每次5min。加过氧化物酶复合物，室温30 min，PBS洗片3次，每次5min。DAB显色，苏木素复染，弱氨水返蓝，水洗，梯度酒精脱水，中性树胶封片。
实验结果：COX-2在乳腺癌组织中的表达：COX-2的表达位于乳腺肿瘤上皮细胞的胞浆内，肿瘤组织中大多数呈中度至高度表达，阳性表达率为86．80％。腺病组织大多数不表达。仅少数呈低表达，阳性表达率为20％，间质细胞及炎症细胞不着色。两者比较差异有显著性意义。COX-2在乳腺癌中的表达与临床病理特征的关系：COX-2的表达与年龄无明显相关性，而与淋巴结转移、临床分期呈正相关。cPLA2在乳腺癌组织中的表达：cPLA2主要着色于肿瘤上皮细胞，以胞浆染色为主，肿瘤组织中阳性表达率为81．9％。腺病组织大多数不表达，仅少数呈低表达，阳性表达率只有13．3％，两者比较差异有显著性意义。cPLA2在乳腺癌中的表达与临床病理特征的关系：cPLA2的表达与年龄无显著性差异，而与淋巴结转移、临床分期呈正相关。
结论：COX-2及cPLA2在乳腺癌组织中的表达明显上调，COX-2及cPLA2的表达与患者年龄无明显相关性，而与临床分期及淋巴结转移呈正相关。COX-2及cPLA2在肿瘤发生、发展中起重要作用，探讨它们与肿瘤的关系，不仅是为了揭示肿瘤发生的分子机理，更重要是应用COX-2抑制剂防治肿瘤。如将COX-2抑制剂用于乳腺癌高危人群的预防，或将COX-2抑制剂与芳香化酶抑制剂联合应用于乳腺癌的内分泌治疗。