【摘 要】
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根据GenBank上登录的苹果(L24497、X65494)、白桦(Y07779)、莴苣(D14001)、大豆(AF303941)和人参(AB236868)等植物的1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)的小亚基rbcS基
【机 构】
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江苏省农业科学院园艺研究所,南京210014;江苏省食品质量安全重点实验室,南京210014江苏省农业科学院园艺研究所,南京210014中国科学院南京土壤研究所,南京210009
【出 处】
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第六届全国梨科研、生产与产业化论坛会
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根据GenBank上登录的苹果(L24497、X65494)、白桦(Y07779)、莴苣(D14001)、大豆(AF303941)和人参(AB236868)等植物的1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)的小亚基rbcS基因氨基酸的高度保守序列,设计一对简并引物,进行RT-PCR.250bp的PCR产物经测序分析及氨基酸序列同源性比对,表明克隆的序列为砂梨rbcS基因的cDNA片段.根据该序列信息,采用RACE (rapid amplification of eDNA ends)的方法扩增其5 ′上游未知区和3′下游未知区.5 ′ RACE得到的cDNA长度约530bp,3′RACE得到的长度约430bp.三段序列拼接后,eDNA全长为840bp,该序列包括一个549bp的开放阅读框、41bp5 ′非编码区和251bp 3 ′非编码区,推测其编码一个由183个氨基酸组成的蛋白.砂梨PprbcS与其他植物的rbcS蛋白同源性分别为:苹果MarbcS (X65494)98.36％、蔷薇科杂交种MdrbcS(L24497) 95.08％、白桦BprbcS(Y07779)83.70％、人参PgrbcS(AB236868)80％、大豆GmrbcS(AF303941)77.60％、莴苣LsrbcS(D14001)67.57％.据此可推断所克隆的序列为砂梨RuBisCO的小亚基cDNA序列.
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