【摘 要】
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[目的]海参加工副产物--生殖腺,含有各种丰富的营养成分.其中,粗蛋白含量超过50％,是高蛋白的原料.以海参生殖腺为ACE抑制活性肽的酶解原料,为实现海参加工副产物的综合利用.[方法]采用酶解、醇沉、膜分离、柱层析等相结合的方法,从海参生殖腺蛋白质中分离纯化ACE抑制活性肽,并用MALDI-TOF-TOF质谱方法解析分离肽的氨基酸序列.[结果]采用复合蛋白酶水解6h后产物具有较高的ACE抑制活性及
【机 构】
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集美大学食品与生物工程学院,福建厦门361021 集美大学食品与生物工程学院,福建厦门361021
【出 处】
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2016年中国水产学会水产品加工与综合利用分会学术年会
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[目的]海参加工副产物--生殖腺,含有各种丰富的营养成分.其中,粗蛋白含量超过50％,是高蛋白的原料.以海参生殖腺为ACE抑制活性肽的酶解原料,为实现海参加工副产物的综合利用.[方法]采用酶解、醇沉、膜分离、柱层析等相结合的方法,从海参生殖腺蛋白质中分离纯化ACE抑制活性肽,并用MALDI-TOF-TOF质谱方法解析分离肽的氨基酸序列.[结果]采用复合蛋白酶水解6h后产物具有较高的ACE抑制活性及水解度(IC50 3.42 mg/mL和16.45％).利用SephadexG25和Zorbax SB-C 18反相色谱柱从＜3 kDa的酶解产物中同时分离获得三种ACE抑制活性肽,经结构解析为Glu-Ile-Tyr-Arg(EIYR),Leu-Phe(LF)和Asn-Ala-Pro-His-Met-Arg (NAPHMR).根据氨基酸序列对其中活性最高的六肽进行化学合成,测定该合成肽的ACE抑制活性IC50为1.51 mM.体外模拟胃肠液消化实验表明,NAPHMR具有较好的稳定性,酶解不影响其活性.利用Lineweaver-Burk双倒数作图法对其抑制动力学进行研究,确定NAPHMR对ACE的抑制类型为非竞争型.[结论]酶解后的海参生殖腺蛋白水解液具有较高的抗高血压生物活性,在海参加工副产物的综合利用及海洋功能性食品的开发中有重要的意义.
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