纳米二氧化硅颗粒与苯并(a)芘联合暴露对BEAS-2B细胞的影响及其机制的研究

来源 :首都医科大学第三届研究生学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rfvbgtyhnmju
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  目的:探讨纳米二氧化硅颗粒与苯并(a)芘联合暴露对BEAS-2B细胞的损伤、致突变及致癌作用,以进一步了解纳米二氧化硅颗粒与苯并(a)芘联合暴露引起肺癌的可能机制.方法:采用体外细胞培养,将纳米二氧化硅与苯并(a)芘联合暴露对BEAS-2B细胞进行染毒,分别为空白对照组,DMSO溶剂对照,纳米SiO2组,B(a)p组,纳米SiO2与B(a)p联合暴露组.分别在染毒30代后收集细胞,通过彗星实验、微核实验、细胞恶性转化实验、软琼脂集落形成实验等,观察联合暴露对BEAS-2B细胞的致突变和致癌作用.应用透射电镜观察联合暴露对BEAS-2B细胞超微结构的损伤作用,采用免疫组化、实时荧光定量PCR的方法检测细胞中p53、Ki-Ras基因的表达.结果:联合暴露可使BEAS-2B细胞培养上清中LDH含量增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),在一定范围内有剂量反应关系,表明联合暴露对细胞膜具有损伤作用.联合暴露对BEAS-2B细胞DNA和染色体具有明显的损伤作用,实验组细胞出现细胞拖尾数、微核细胞数明显增加,彗星细胞拖尾率、微核率明显高于对照组,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).联合暴露可诱导BEAS-2B细胞能在软琼脂上形成克隆;对BEAS-2B细胞超微结构形成损伤,可诱导BEAS-2B细胞有较高的p53基因和蛋白表达,而且Ki-Ras基因可疑阳性表达.结论:纳米二氧化硅与苯并(a)芘联合暴露对BEAS-2B细胞DNA和染色体具有损伤作用,增强细胞恶性转化能力,可诱导BEAS-2B细胞p53蛋白和P53、Ki-ras基因表达增强.
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