【摘 要】
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目的：本研究通过阐明Klf-4在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤肿瘤干细胞特性和转移能力的相互关系，在加深拓展对Klf-4蛋白的功能作用的认识外，更为骨肉瘤治疗发现新的特异性分子
【出 处】
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第八届中国肿瘤学术大会暨第十三届海峡两岸肿瘤学术会议
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目的：本研究通过阐明Klf-4在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤肿瘤干细胞特性和转移能力的相互关系，在加深拓展对Klf-4蛋白的功能作用的认识外，更为骨肉瘤治疗发现新的特异性分子靶点，从而推动临床骨肉瘤的有效治疗。
方法：1)通过Western blot检测呈现不同细胞迁移运动能力的骨肉瘤细胞KHOS、U20S、MG63的Klf-4表达水平，应用慢病毒转染技术和siRNA干扰手段分别在骨肉瘤KHOS和U20S上高表达或沉默Klf-4蛋白，运用划痕修复实验及Transwell小室模型实验检测Klf-4蛋白表达高低对细胞迁移运动能力的影响;2)利用光学显微镜观察高表达Klf-4对骨肉瘤细胞的形态变化，同时通过肿瘤微球形成实验考察高表达Klf-4蛋白对骨肉瘤细胞KHOS、U20S的白我更新能力的影响;3)应用RT-PCR技术检测Klf-4对经典干细胞转录因子(Oct-4、Nanog)的转录水平的影响;4)利用SRB染色法和PI染色结合流式分析检测骨肉瘤(KHOS、U20S)在Klf-4蛋白表达增加对常规化疗药物阿霉素和顺铂的敏感性。
结果：1)骨肉瘤细胞中Klf-4蛋白水平的表达水平与细胞自身的迁移运动能力呈高度的正相关性，外源性过表达Klf-4蛋白能促进骨肉瘤细胞的迁移运动能力，反之沉默Klf-4蛋白水平则会减弱细胞的迁移运动能力;2)外源性过表达Klf-4蛋白能引起骨肉瘤细胞发生EMT样的表型变化;3)骨肉瘤细胞内高表达Klf-4蛋白显著增强骨肉瘤细胞的sphere形成能力，并会引起干细胞经典转录因子mRNA水平的增加;4)Klf-4蛋白能显著增强骨肉瘤细胞对骨肉瘤化疗药物的抵抗性。
结论：Klf-4蛋白是维持骨肉瘤肿瘤干细胞特性所必须的，其表达水平与骨肉瘤的转移能力密切相关，提示Klf-4可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点。
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