【摘 要】
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为了实现酶法生产维生素C-2磷酸酯,将含有来自黄质杆菌(Sphingomonas trueperi)编码的维生素C磷酸化酶基因asp的表达载体pET-20b-转化大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (
【机 构】
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食品科学与技术国家重点实验室,无锡,214122
【出 处】
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第五届全国微生物基因组学及合成生物学学术研讨会暨陈华葵先生100周年纪念大会
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为了实现酶法生产维生素C-2磷酸酯,将含有来自黄质杆菌(Sphingomonas trueperi)编码的维生素C磷酸化酶基因asp的表达载体pET-20b-转化大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (DE3),获得重组菌(E.coli) BL21 pET20b--asp),目的基因可表达出有活性的维生素C磷酸化酶；通过优化确定了重组菌产酶的最优诱导条件为诱导温度为37℃,诱导剂为6 g/L的乳糖,诱导时菌体状态为OD值0.6,诱导时间为4h,在此诱导条件下胞内维生素C磷酸化酶活力3.2 U/mL；初步探究利用维生素C磷酸化酶转化维生素C生产维生素C-2磷酸酯的转化条件,确定了温度为40℃,pH为4.2,底物维生素C和焦磷酸钠的浓度分别为1.2mol/L和0.6 mol/L,菌体量为10.6 g/L,在此条件下转化2h维生素C-2磷酸酯产量达到82 g/L.为工业酶法生产维生素C-2磷酸酯奠定了基础.
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