【摘 要】
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目的:肝癌是由病毒、化学致癌物等多病因作用,因癌基因或癌相关基因激活、抑癌基因失活等诸多因素引起肝细胞生长失控而致癌变,其中数百种基因调控和表达与HCC发生、发展相关
【机 构】
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江苏,南通大学附属医院临床医学研究中心 226001
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目的:肝癌是由病毒、化学致癌物等多病因作用,因癌基因或癌相关基因激活、抑癌基因失活等诸多因素引起肝细胞生长失控而致癌变,其中数百种基因调控和表达与HCC发生、发展相关.ANXA2表达及蛋白翻译后异常修饰与HCC的发生发展、侵袭和转移有着密切关系.ANXA2在HCC细胞,尤其是有着高转移潜能和侵袭能力的HCC细胞中高表达,且shRNA介导的ANXA2干扰抑制了肝癌细胞的增殖和侵袭、迁移潜能,提示ANXA2不仅可探讨HCC发病机制,且可作为肝癌基因治疗的潜在分子靶目标.本文观察下调膜联蛋白A2(Annxin A2,ANXA2)表达对肝癌(HCC)细胞生物学行为的影响.
方法:以定量PCR分析不同肝癌细胞ANXA2 mRNA转录水平,以Western blotting分析ANXA2表达;以免疫荧光检测ANXA2在细胞内表达和分布;以PI染色和流式细胞术分析细胞周期;以CCK-8试剂盒分析细胞增殖潜能;以transwell实验分析侵袭潜能;以创伤愈合实验分析迁移潜能;以裸鼠移植瘤模型分析致瘤潜能.
结果:高侵袭潜能MHCC97-H细胞ANXA2表达明显高于HepG2、SMMC-7721和SMMC-7402和LO2细胞;特异性shRNA沉默ANXA2效率在80％以上;免疫荧光显示ANXA2定位于细胞膜和细胞质,胞核少见;下调ANXA2表达致HCC细胞S期比例下降,癌细胞增殖抑制率为44.2％(t=11.187,P＜0.001)、侵袭抑制率为39.5％(t=7.093,P＜ 0.001)和迁移抑制率为36.5％(t=10.314,P＜0.001);体内移植瘤模型显示裸鼠皮下肿瘤生长抑制率为38.2％(t=7.949,P＜ 0.001).
结论:下调ANXA2基因转录显著影响肝癌细胞的生物学行为,可望成为肝癌分子治疗的潜在靶目标.
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