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目的:本实验通过研究Dasatinib对AML细胞的诱导分化作用,并进一步探讨自噬在这一诱导分化作用中所扮演的角色,为发现新型分化诱导剂提供研究方向和理论依据.
方法:用台盼蓝拒染法结合血细胞计数观察细胞增殖情况;CD11b结合流式细胞术,NBT还原染色法以及瑞士吉姆萨染色法测定细胞分化;PI/AnnexinV染色结合流式细胞术检测细胞凋亡;PI染色结合流式细胞术确定细胞周期分布;MDC染色考察细胞自噬水平;RT-PCR法检测基因水平的变化;Western blot法检测相关蛋白表达变化;荧光素酶检测研究基因的转录活性.
结论:Dasatinib能够明显诱导AML细胞发生分化;并且自噬参与调控这一诱导分化过程.增强自噬可以促进诱导分化能力,抑制自噬则减弱诱导分化的效果.