比较不同方法肝脏靶向性导入抗TGF-β1siRNA对肝细胞TGF-β/Smad信号传导通路影响

来源 :第十七次全国中西医结合肝病学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sdrb_123456
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目的:比较抗TGF-β1siRNA靶向性进入肝细胞的四种转染方式,在抗肝损伤与纤维化及对TGF-β/Smad信号传导通路影响中的效果差异,并探讨各自的优劣。 方法:已启动肝组织中的TGF-β/Smad信号传导通路的50只模型鼠,随机分为模型对照组、尾静脉直接注射组、脂质体包裹组、流体动力学法组,和肝动脉插管组等5组,每组10只;将构建的TGF-β1siRNA质粒分别通过尾静脉直接注射、脂质体包裹、流体动力学法、肝动脉插管等方式导入肝脏靶细胞:分别通过血清指标ALT、AST、HA;取肝组织,HE染色病理检测;PT-PCR技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β和mad3表达;免疫组化技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β和Smad3蛋白的表达。 结果:抗TGF-β1siRNA质粒经过以上四种导入方法转染入靶细胞,均能有效地阻断大鼠肝组织中的TGF-β/Smad信号传导通路的传导(P<0.05);四种导入方法比较,肝动脉插管组与脂质体包裹组效果相当(P>0.05),但优于尾静脉直接注射组及流体动力学法组(P<0.05),尾静脉直接注射组效果最差(P<0.05)。 结论:抗TGF-β1siRNA质粒经肝动脉插管途径转染,是一种安全、高效的外源基因肝脏靶向导入转染方法。
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