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目的:本研究拟探索检测机采血小板中游离DNA的含量,它们在不同ABO血型机采血小板制品中的分布情况,以及受机采血小板保存时间、去白细胞过滤和离心等因素的影响情况。
方法:尽快从机采血小板中取出标本,然后将其分成几份,并在血小板采集后的4小时内、24小时、48小时和72小时分别对过滤前后,离心前后的标本分别进行DNA抽提,最后用荧光定量PCR方法对其中的人类白蛋白基因进行检测。
结果:ABO血型不同的机采血小板在保存时间相同的条件下,其细胞外游离DNA含量无显著差异。过滤前机采血小板在采集后的4小时内、24小时、48小时和72小时时游离DNA的含量分别为13.0±6.7 WBCs/μl,25.1±12.6 WBCs/μl,43.5±28.7WBCs/μl和136.8±77.6 WBCs/μl。对于过滤后的标本,其相应值则为8.0±3.9 WBCs/μl,18.2±3.9 WBCs/μl,44.3±19.6 WBCs/μl和104.7±52.2WBCs/μl。过滤前后和不同保存时间之间,其游离DNA含量均具有显著区别(前者P<0.05,后者P<0.01)。但是过滤前后的总DNA不随保存时间而变化。
结论:机采血小板中含有大量细胞外游离DNA,它们在使用荧光定量PCR方法进行残留白细胞检测时会影响结果的准确性。不同血型机采血小板中游离DNA含量一致。但游离DNA含量会随着机采血小板保存时间的延长而显著上升,过滤会使其降低。