草鱼呼肠孤病毒衣壳蛋白VP7基因真核表达载体pEGFP-N1-VP7的构建及鉴定

来源 :第十一届全国水产青年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:l309553042
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  根据本实验室构建的含有编码草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)主要衣壳蛋白VP7的pMD 19-T-VP7基因序列,设计编码VP7蛋白的特异性引物,扩增获得830bp的目的基因片段(不含终止密码子).将其克隆入真核表达载体pEGFP-N1,得到阳性重组质粒pEGFP-N1-VP7.用脂质体法将其转染入真核细胞COS-1和CIK并进行瞬时表达,荧光显微镜观察及特异性RT-PCR检测结果表明:已成功将目的片断转染到COS-1和CIK细胞,并得到了初步表达.此研究为GCRV基因疫苗的研制提供了实验资料.
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