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妊娠母猪日粮中添加适量精氨酸可以提高其产仔性能.研究发现,精氨酸能促进母猪胎盘生长发育及血管增生,提高胎盘效率,从而提高胚胎成活率,增加窝产活仔数.胎盘的生长发育主要是滋养层细胞的增殖、分化、浸润及融合的过程.本课题研究精氨酸对母猪胎盘滋养层细胞增殖分化的影响.试验挑选妊娠35～40天的健康初产母猪,麻醉后手术摘取子宫胎盘,无菌条件下获取新鲜绒毛组织,对胎盘绒毛组织进行消化、分离、培养24小时后,进行HCG-β、波形蛋白免疫化学染色鉴定滋养层细胞,同时用Giemsa染色、相差显微镜、扫描电镜观察细胞形态.选用培养3～4代生长良好的滋养层细胞,消化稀释成4×100个/mL后,等细胞数量接种于96孔培养板,培养24小时后,更换为不同精氨酸浓度(0、0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.4mmol/L、0.7mmol/L、1.1mmol/L、1.6mmol/L、3.2mmol/L、6.4 mmol/L,n=6)的培养液继续培养,培养2天、4天、6天,分别用相差显微镜、扫描电镜、流式细胞仪、MTT法、高效液相色谱(HPLC)等实验仪器和方法检测精氨酸对母猪胎盘滋养层细胞增殖分化的影响.结果表明,通过化学染色和细胞形态观察,实验细胞为胎盘滋养层细胞.同时本实验处理条件下精氨酸浓度对滋养层细胞增殖分化(培养4天)产生二次曲线影响趋势,低浓度精氨酸(0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.4 mmol/L)有利于细胞增殖,高浓度精氨酸(0.7mmol/L、1.1 mmol/L、1.6mmol/L、3.2mmol/L、6.4 mmol/L)能促进细胞的分化融合.其中0.4mmol/L的精氨酸对细胞的增殖分化表现出随着培养时间推移,产生前期(2天)增殖效果显著,后期(6天)细胞呈现分化融合的趋势(P＞0.05).添加含0.4 mmol/L精氨酸培养液,可以显著提高培养4天细胞及上清液一氧化氮和多胺的产生(P＜0.05),同时细胞中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和鸟氨酸脱羧酶(ODC)酶活及mRNA表达量显著增加(P＜0.05).以上结果表明,精氨酸可以促进母猪胎盘滋养层细胞的增殖分化,其中0.4 mmol/L精氨酸浓度有利于细胞增殖分化,同时能提高细胞一氧化氮和多胺的生成.