【摘 要】
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目的：明确椎间盘髓核细胞对周期性牵张应力的反应情况,有助于更好地利用细胞学方法来进行椎间盘退变的相关研究,因此本研究观察了周期性牵张应力对体外培养的人髓核细胞增
【出 处】
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第十八届全国中西医结合骨伤科学术研讨会
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目的：明确椎间盘髓核细胞对周期性牵张应力的反应情况,有助于更好地利用细胞学方法来进行椎间盘退变的相关研究,因此本研究观察了周期性牵张应力对体外培养的人髓核细胞增殖的影响,研究应力与人髓核细胞早期力学应答的关系,为椎间盘退变的预防与治疗提供新的理论依据.方法：人髓核组织取自1例因车祸致椎间盘脱出的手术患者,年龄29岁,无菌条件下采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶消化髓核组织获取原代髓核细胞并培养传代,对体外培养至第一代的人髓核细胞利用甲苯胺蓝、番红O和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色进行鉴定,并将P3代细胞接种于硅橡胶弹性膜片上,待贴壁后移入ElectroForce 3200力学试验仪搭载的BioDynamic生物反应舱内对其施加0、5％、10％和15％的应变作用3h,受力完成后继续培养24h,用流式细胞仪测定细胞周期,计算S期百分数及增殖指数.结果：实验所培养出来的细胞,甲苯胺蓝染色显示核呈蓝色,基质着色稍淡,说明细胞可以分泌糖胺多糖；番红-O染色显示细胞被染成红色,圆形或短梭形,说明细胞可以分泌蛋白多糖；Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色显示细胞胞浆染成棕黄色,说明细胞能分泌合成Ⅱ型胶原,细胞核基本不着色,苏木素复染后核呈蓝色,胞浆仍为棕黄色.故本实验所培养出来的细胞为髓核类软骨细胞.应力刺激后各组细胞贴壁及形态良好；与其它组相比,发现在10％和15％应变作用3h后髓核细胞的S期百分数及增殖指数明显增加(P＜0.05).结论：应力在人髓核细胞增殖过程中起着重要的作用,并且在一定周期性应力范围内,髓核细胞的增殖能力增强.
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