【摘 要】
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在大肠杆菌及相关细菌的碳代谢调节子中,Eσ依赖型启动子的转录需要CRP-cAMP复合体来激活.在氮代谢调节子中,关键启动子ghnAp2是Eσ依赖型的,在氮源缺乏的条件下由氮调控因子
【机 构】
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北京大学生命科学学院 蛋白质暨植物基因工程国家重点实验室
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在大肠杆菌及相关细菌的碳代谢调节子中,Eσ<70>依赖型启动子的转录需要CRP-cAMP复合体来激活.在氮代谢调节子中,关键启动子ghnAp2是Eσ<54>依赖型的,在氮源缺乏的条件下由氮调控因子NtrC来激活.这里我们展示一个现象即:当细胞生长在不同碳源中时,glnAp2的表达水平有很大差异.我们证明CRP抑制glnAp2启动子,并且这种抑制作用是cAMP依赖型的.定点突变和删除分析表明,典型的(位于σ<70>依赖型glnAp1启动子上游-70.5)和推测的(位于glnAp2启动子上游)CRP-cAMP结合位点对抑制作用并非是必需的.当用另一个激活蛋白NifA来激活glnAp2时,这种抑制作用仍然存在.引物延伸实验和体内高猛酸钾印迹实验表明,抑制作用发生在转录水平上(Tian et al.,2001).这个结果与我们以前在另一个σ<54>依赖型启动子上的研究是一致的(Wang etal.,1998).实验表明大肠杆菌glnHp2和glnK启动子和肺炎克氏杆菌nifB、nifE、nifF、nifJ、nifLA和nifU启动子也被CRP-cAMP复合体抑制.以上研究提供了碳代谢和氮代谢调节子之间的新的调控偶联.
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