【摘 要】
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氧化应激、电离辐射或诱变剂可以导致DNA碱基缺失,未及时修复的碱基缺失具有遗传毒性.本研究的目的是构建可以特异性定量检测DNA脱碱基位点的光电化学传感器.该传感器基
【机 构】
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环境化学与生态毒理学国家重点实验室 中国科学院生态环境研究中心,北京市海淀区双清路18号,100085
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氧化应激、电离辐射或诱变剂可以导致DNA碱基缺失,未及时修复的碱基缺失具有遗传毒性.本研究的目的是构建可以特异性定量检测DNA脱碱基位点的光电化学传感器.该传感器基于一个可以特异性共价标记DNA脱碱基位点的化学探针以及一个具有光电化学特性的信号分子,最终实现对DNA脱碱基位点的特异性定量检测.在构建过程中,将设计序列的DNA进行酶处理,形成含有脱碱基位点(AP sites)的DNA标准品；然后利用化学探针对AP sites进行特异性共价标记.通过电化学工作站收集探针产生的光电信号.该方法提供了一种选择性好的定量检测AP sites的方法,可用于筛选一类能够造成AP sites的外源性化学物质.首先通过电泳实验验证思路的可行性,其中DNA经过酶处理能够形成AP sites,其结果如Fig.1所示.由Fig.1(a)与(b)对比可知,酶能特异性地形成脱碱基位点的损伤；(b)与(c)、(d)对比可知,探针对DNA脱碱基位点具有有效的识别作用.其次通过电化学工作站收集实验组和对照组的信号,通过优化试剂浓度和用量、调节溶剂pH、优化反应条件等方法,构建光电化学方法特异性检测AP sites的传感器.
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