【摘 要】
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目的 探讨重组人p53腺病毒瘤内注射后p53基因和靶基因的表达.方法 选择2005年9月-2006年12月在我院接受重组人p53腺病毒制剂."今又生"(Gendicine)治疗和放疗的恶性肿瘤患者25例,在基因治疗前和治疗后48小时,通过鼻咽镜活检或在B超引导下穿刺活检获取肿瘤标本,每次取三份标本,一份标本用于检查病理,一份用于免疫组化检测P53,P21,Bax和VEGF蛋白；另一份则用于p53m
【机 构】
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北京大学肿瘤医院放疗科 北京市海淀区阜成路52号,100142 北京大学肿瘤医院胃肠外一科 北京市
【出 处】
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北京大学医学部近距离放疗研究中心成立大会暨北京大学第三届国际放射肿瘤学术论坛
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目的 探讨重组人p53腺病毒瘤内注射后p53基因和靶基因的表达.方法 选择2005年9月-2006年12月在我院接受重组人p53腺病毒制剂."今又生"(Gendicine)治疗和放疗的恶性肿瘤患者25例,在基因治疗前和治疗后48小时,通过鼻咽镜活检或在B超引导下穿刺活检获取肿瘤标本,每次取三份标本,一份标本用于检查病理,一份用于免疫组化检测P53,P21,Bax和VEGF蛋白；另一份则用于p53mRNA RT-PCR检测,部分cDNA样品送检测序.结果 所有标本全部证实为恶性肿瘤,其中头颈部癌19例,软组织肉瘤5例；免疫组化检测结果显示：治疗后肿瘤内P53、P21、Bax蛋白表达均较疗前增加,VEGF蛋白表达则较疗前减少.按阳性率比较,治疗后P53,P21,Bax和VEGF蛋白表达与治疗前相比,均有统计学意义(p值均小于0.05).进一步对免疫组化结果 进行评分,然后比较,结果发现疗后P53蛋白较疗前明显增加,接近显著性差异(p=0.055),P21蛋白疗后增加显著,有统计学意义(p=0.015),Bax蛋白疗后表达虽增加,但无统计学意义(p=0.088),VEGF蛋白疗后虽减少,也无统计学意义(p=0.308).17对cDNA样品RT-PCR结果显示：治疗前p53mRNA弱阳性率为64.7％(11/17),阴性率为35.3％(6/17),治疗后p53mRNA 94.1％(16/17)为阳性,其中弱阳性率为35.3％(6/17),中强阳性率为58.8％(10/17),说明治疗后有p53mRNA增加,并有统计学意义(p=0.000).对3对有疑义的样品进行cDNA测序,结果显示："今又生"治疗后的3个样品p53cDNA序列与提供的专有p53cDNA序列完全一致,而治疗前的3个样品中则有2个样品的序列与专有p53cDNA序列相差很大,仅1个治疗前样品的p53cDNA序列与提供的专有序列基本相同.上述测序结果提示,外源腺病毒p53基因确已转入肿瘤细胞并在其中表达.结论 腺病毒介导的野生型p53基因能够在肿瘤细胞内充分表达,并可通过下游基因抑制肿瘤细胞生长、诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管生成.
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