镉对体外培养成骨细胞碱性磷酸酶活性及表达的影响

来源 :第七届全国环境与职业医学研究生学术研讨会暨复旦大学博士生论坛:环境与职业医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ivy1128
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[目的]研究镉对体外培养成骨细胞(osteoblast,OB)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及表达的影响,以探讨镉骨毒性机理. [方法]混合酶消化法分离大鼠颅盖骨OB,进行原代培养.OB经不同浓度的镉(Cadmium,Cd)作用后,通过ALP组织化学染色及对硝基苯磷酸盐(PNPP)法检测OB细胞的ALP活性,同时应用RT-PCR方法观察Cd对ALP基因表达的影响. [结果]镉作用后24 h,Cd处理组的ALP活性无明显变化.Cd作用后48 h,各剂量Cd处理组的ALP活性均明显低于对照组(P<0.05).Cd作用后48 h和72 h,ALP染色可见Cd处理组ALP表达明显减少.RT-PCR结果显示,Cd作用后24 h,0.5 μmol/L、1.0 μmol/L.剂量组的ALP/β-Actin光密度值与对照相比没有显著差异,但是2.0μmol/L剂量组的ALP/β-Actin光密度值较对照明显降低(P<0.05);2.0μunol/L Cd作用后48 h及72 h,ALP/β-Actin光密度值较对照组明显降低(P<0.05). [结论]Cd离子可以抑制体外培养OB细胞ALP活性及表达,抑制OB分化.
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