论文部分内容阅读
目的：本文拟在探讨CB2受体激动剂JWH-015通过时间依赖性的调控炎性反应及星型胶质细胞的活性对大鼠胫骨癌性疼痛的影响.方法：将雌性SD大鼠97只,体重160～180g,随机分成4组,包括：假手术组、癌痛+JWH-015组、癌痛+AM630+JWH-015组、癌痛+DMSO(二甲基亚砜)组.采用右侧胫骨干骺端骨髓腔内注射5μl Walker256(1×105/μl)乳腺癌细胞的方法制备大鼠胫骨癌痛模型,在接种后的第10d鞘内分别注射JWH-015(10 μg/10μl)、AM630(15μg/10 μl)+JWH-015(10μg/10 μl)或DMSO 10μl,AM630在JWH015注射前30min给药.于肿瘤细胞接种前1d、接种后4d、7d、10d、给药后6h、24h、72h测定右后足底机械性缩足阈值(PMWT)和行走痛行为评分,并于相应时间点从各组分别随机选取10只大鼠,处死取脊髓,采用免疫印记技术观察脊髓IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α的表达,采用免疫荧光法观察各组大鼠脊髓背角星型胶质细胞的活化情况.结果：术前各组大鼠的机械性缩足阈值和行走痛行为评分无统计学意义(P＞0.05).与基础值相比,术后各个时间点假手术组大鼠机械性缩足阈值和行走痛行为评分无明显变化(P＞0.05),而癌痛组大鼠术后7d机械性缩足阈值显著降低,行走痛行为评分显著增加(P＜0.05).与假手术组相比,癌痛组大鼠术后4d脊髓炎性因子IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达水平明显升高,且星型胶质细胞在术后10d明显活化(P＜0.05)；鞘内注射JWH-015时间依赖性的改善痛行为学,降低炎性因子的表达水平,抑制星型胶质细胞的活化,其中给药后24h效果最佳,而这种作用可以被AM630阻断.讨论：本实验条件下,随着大鼠骨癌痛的发展,脊髓炎性反应逐渐增加,星型胶质细胞逐渐活化,单次鞘内注射CB2受体激动剂JWH-015可以通过时间依赖性的降低脊髓炎性反应及星型胶质细胞的活性,从而降低癌痛大鼠的缩足反应及行走痛行为学评分,抑制其痛觉过敏或痛觉超敏的产生.本文对CB2在骨癌痛中的作用的基础研究,有助于更好的探讨其机制,并未临床开发新型的镇痛药物提供相关的理论基础.