JNK/c-Jun信号通路在低浓度亚砷酸钠所致HELF细胞增殖异常和细胞周期紊乱中的作用

来源 :中国毒理学会第五次全国学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:BruceLee_123
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  [目的] 探讨JNK/c-Jun信号通路和细胞周期调节素cyclin D1在低浓度亚砷酸钠(NaAsO2)所致人胚肺成纤维(HELF)细胞增殖异常和细胞周期紊乱中的作用.[方法]分别用0.0、0.1、0.5和5.0μM NaAsO2处理HELF细胞12、24和48 h后,检测HELF细胞增殖率、细胞周期、磷酸化JNK、总JNK、磷酸化c-Jun、总c-Jun和cyclin D1蛋白表达水平;用20 μM JNK抑制剂SP600125预处理HELF细胞30min或用20 nM JNK siRNA或c-Jun siRNA分别转染HELF细胞24h阻滞JNK/c-Jun信号通路后,再用0.0、0.1、0.5和5.0 μM NaAsO2处理HELF细胞12或24h后,观察上述指标变化情况.[结果]低浓度0.1和0.5μM NaAsO2可引起HELF细胞增殖显著升高,而高浓度5.0μM NaAsO2则引起HELF细胞增殖显著降低;低浓度0.1和0.5μMNaAsO2可促进HELF细胞由G1期向S期跃迁,促进HELF细胞增殖,而高浓度5.0μM NaAsO2则引起HELF细胞G2/M期阻滞,抑制细胞增殖;低浓度0.1和0.5μM NaAsO2引起cyclin D1蛋白表达水平明显升高,并在早期不同程度引起JNK和c-Jun的磷酸化水平明显升高,且其浓度-效应和时间-效应的变化与cyclin D1蛋白表达水平升高变化基本一致,而高浓度5.0 μM NaAsO2未引起cyclin D1蛋白表达、JNK和c-Jun磷酸化水平明显变化.JNK特异性抑制剂SP600125预处理和JNK siRNA或c-Jun siRNA转染HELF细胞,阻滞JNK/cJun信号通路后,低浓度0.1和0.5μM NaAsO2所致HELF细胞增殖异常和细胞周期紊乱基本消失;且其所致cyclin D1蛋白表达升高也随之降低,从而说明低浓度NaAsO2通过激活JNK/c-Jun信号通路诱导HELF细胞周期调节素cyclin D1蛋白表达升高,而引起HELF细胞从G1期跃迁入S期,引起HELF细胞周期紊乱而介导HKLF细胞增殖升高.[结论] JNK/c-Jun信号通路和cyclin D1蛋白在低浓度NaAsO2所致HELF细胞增殖异常和细胞周期紊乱过程中发挥重要作用.
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