【摘 要】
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在这个实验过程中,我们尝试利用电击法将构建的携带有桑天牛纤维素酶基因的PiggyBac质粒转入家蚕秋枫品系卵中,并在其G0和G1代基因组中检测到纤维素酶基因的存在。桑天牛
【机 构】
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中国江苏省镇江市学府路301号,江苏大学,生命科学研究院
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在这个实验过程中,我们尝试利用电击法将构建的携带有桑天牛纤维素酶基因的PiggyBac质粒转入家蚕秋枫品系卵中,并在其G0和G1代基因组中检测到纤维素酶基因的存在。桑天牛纤维素酶(Ag-EgaseI)属于GHF45家族,有较高的β-1,4内切糖苷水解酶活性,其开放阅读框大小为711bp,编码237个氨基酸。利用较成熟的PiggyBac转基因技术,以家蚕肌动蛋白(Actin3)启动子,SV40的多聚腺苷酸识别序列为终止子,启动和终止纤维素酶基因的表达,采用3×P3启动子系统启动的绿色荧光蛋白作为报告基因对家蚕生产品种秋枫进行转基因操作,利用电穿孔法,快速大量的处理采集到的产后4h内的蚕卵,在28度,环境湿度80%的条件下培养,并在G0和G1代基因组中检测到外源桑天牛纤维素酶基因存在。
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