【摘 要】
：
本试验以5ml大管解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率和人工授精结果为判定指标，筛选冷冻Ⅰ液和冷冻Ⅱ液中N-乙酰-D-氨基葡萄糖(N-Acetyl-Glucosamine，N-AcGA)、甘油和卵黄的适宜浓度，寻找适宜的平衡时间和冷冻高度。结果表明：在冷冻Ⅰ液中添加0.1％的N-AcGA，冷冻Ⅱ液中添加4％的甘油，冷冻液中的卵黄终浓度为10％时效果最佳。在4℃中甘油平衡2h，冻后顶体完整率比对
【机 构】
：
上海农业科学院畜牧兽医研究所 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室,上海 201106 上
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会
论文部分内容阅读
本试验以5ml大管解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率和人工授精结果为判定指标，筛选冷冻Ⅰ液和冷冻Ⅱ液中N-乙酰-D-氨基葡萄糖(N-Acetyl-Glucosamine，N-AcGA)、甘油和卵黄的适宜浓度，寻找适宜的平衡时间和冷冻高度。结果表明：在冷冻Ⅰ液中添加0.1％的N-AcGA，冷冻Ⅱ液中添加4％的甘油，冷冻液中的卵黄终浓度为10％时效果最佳。在4℃中甘油平衡2h，冻后顶体完整率比对照组(0h)有显著提高(P＜0.05)。距液氮面1 cm处冷冻对精子，对活力和顶体完整性都有明显的保护作用。冷冻精液的体外受精(IVF)能力和新鲜精液没有显著差异(P＞0.05)。在人工授精方面，5ml大管冷冻精液平均获得了超过80％的受胎率。扫描电镜超微结构观察表明，冷冻对精子最明显的破坏表现在顶体上，它能使顶体膨胀或泡状化。
其他文献
根据PRRSVVR-2332毒株核苷酸序列,设计针对GP5基因的特异引物,以PRRSVJL/07/SW毒株细胞培养物为模板,利用RT-PCR方法,成功的扩增出GP5基因,将该基因与真核表达载体pCI-neo连接,转染Marc-145细胞中,用间接免疫荧光试验、SDS-PAGE和western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果：RT-PCR分别扩增出GP5基因大小与预期一致,与国际PRRSV美洲型V
从山东某大型猪场发病猪群中分离到PRRSV病毒(SX-1株)。用RT-PCR法对该分离株的NSP2和ORF5基因进行了扩增和克隆,并对其进行核苷酸序列测定和分析,结果表明,PRRSV SX-1株的NSP2发生30个氨基酸的不连续缺失,缺失位置与JXA1毒株相同;ORF5基因与JXA1、CH-1a、VR2332核苷酸同源性分别为98.8％、94.9％、88.9％,氨基酸同源性分别为99.0％％、93
根据CrenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因序列,设计1对包含完整ORF5基因序列的特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV GD-11分离株的ORF5基因,并对其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV GD-11分离株的ORF5基因克隆到含msyB伴侣基因的可溶表达载pBCX上构建重组表达质粒。结果显示,扩增获得的DNA片段约为60
本研究利用口蹄疫病毒(FMDV)2A蛋白具有自我裂解的功能,将其作为连接肽将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的GP5和M蛋白编码基因串联,置于复制缺陷型腺病毒载体的表达盒中,通过一次转录和翻译,可以同时实现两个蛋白的表达,以发挥GP5蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势作用。分别利用RT-PCR、间接免疫荧光和Western blot等方法,对获得的重组腺病毒(rAd-GP5-2A-M)进
本研究从广东省某猪场患有明显呼吸道症状的仔猪肺脏组织中分离到一株病毒,利用RT-PCR、基因序列分析,确定为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),命名为TM株。Nsp2基因序列分析发现,与美洲型标准毒株VR-2332相比,在481位和532-560位共有30个氨基酸缺失。此外,TM株较之近年来国内出现的PRRSV变异株在22-42位氨基酸出现22个氨基酸的独有缺失。病毒猪体回归试验表明,该分
为探索新型高效安全的猪蓝耳病疫苗免疫佐剂,本实验用离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒包裹猪融合基因PIL-46和CpG基序的真核表达质粒(CNP-(VRIL-46+VRlC)),将CNP-(VRIL-46+VRlC)肌注接种过猪蓝耳病灭活苗的长白川白杂交猪,接种后1、2、4、6和8周采取实验猪静脉血,用Sandwich ELISA检测血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6和IgG、IgA、I
为进一步证实PRRSV变异株(NSP2 1594-1680bp缺失)感染发病规律,本研究时2株分离鉴定的PRRSV变异株进行动物回归试验。结果表明高热是PRRSV变异株感染猪群的特征性反应,攻毒17d左右存活猪体温恢复正常;试验发病猪症状及病理变化与临床发病猪相似,因此在临床诊断上具有重要意义。不同毒株致病性不同,在发病、死亡时间和死亡率上存在较大差别,GDQJ株攻毒后临床发病而未死亡,因此将PR
从2003年～2008年湖南省疑似PMWS病死猪组织中分离获得7株猪2型圆环病毒(PCV2),分别命名为：HuN-03、HuN-05、HuN-0601,HuN-0602、HuN-0701 HuN-0702、HuN-08。用PCR的方法对这7株病毒进行进行全基因扩增及测序分析,结果显示,7株PCV2分离株基因组全长均为1767nt,有典型的PCV2基因组结构;病毒毒株间同源性在94.9-99.3％之
本文对供体牛超排发情输精时所采用的精液形式及输精时间进行了研究，结果表明超数排卵时应用鲜精输精可以有效提高受精率和可用胚率，二者在获胚数量上差异不显著，在获一级胚数量上差异显著。通过本试验的研究，以期在生产实践中对胚胎移植技术的应用和推广有所借鉴。
2006年9月下旬，应用电刺激采精技术，采集中国农业科学院特产研究所茸鹿实验基地成年梅花鹿种公鹿精液，1：1稀释后，在5小时内送到流式细胞仪实验室。经过荧光素Hochest33342前处理后，使梅花鹿精子通过流式细胞计数器，根据精子荧光强度的不同实现梅花鹿X精子和Y精子的区分和分离，结果分别获得94％Y精子和91％X精子纯度的梅花鹿XY分离精液。将分离精液平衡，稀释后装入0.25ml细管中，每管含