【摘 要】
：
目的：目前,抑癌基因LKB1与mTOR信号传导途径的联系在非小细胞肺癌还不明确,本文利用LKB1野生型与LKB1突变型的非小细胞肺癌细胞系、LKB1稳定knockdown的同源细胞系进一步研究证实肺癌细胞中LKB1与mTOR之间的调节关系.方法：采用慢病毒系统建立LKB1稳定knockdown的同源细胞系,用荧光定量RT-PCR和Western blot检测LKB1的表达;2-DG处理LKB1野生
【机 构】
：
天津医科大学总医院呼吸科 天津医科大学总医院肺癌研究所
【出 处】
：
中国抗癌学会肺癌专业委员会第十二届全国肺癌学术大会
论文部分内容阅读
目的：目前,抑癌基因LKB1与mTOR信号传导途径的联系在非小细胞肺癌还不明确,本文利用LKB1野生型与LKB1突变型的非小细胞肺癌细胞系、LKB1稳定knockdown的同源细胞系进一步研究证实肺癌细胞中LKB1与mTOR之间的调节关系.
方法：采用慢病毒系统建立LKB1稳定knockdown的同源细胞系,用荧光定量RT-PCR和Western blot检测LKB1的表达;2-DG处理LKB1野生型与LKB1突变型的非小细胞肺癌细胞系、LKB1稳定knockdown的同源细胞系,Western blot分别检测AMPK和S6K的磷酸化水平;用Compound C(AMPK活性抑制剂)预处理细胞,再给予2-DG处理,Western blot检测S6K的磷酸化水平;不同浓度的2-DG处理LKB1野生型细胞后用细胞增殖实验检测LKB1野生型与LKB1突变型的细胞生长的差异.
结果：LKB1稳定knockdown细胞系的LKB1 mRNA和蛋白表达水平均显著降低;2-DG处理后,在LKB1野生型细胞系中,AMPK磷酸化水平增加,而在LKB1突变型细胞系中AMPK的磷酸化水平没有明显变化;2-DG处理后,在LKB1野生型细胞系中,S6K的磷酸化水平明显降低,而在LKB1突变型细胞系中,2-DG对S6K的磷酸化没有影响,LKB1稳定knockdown同源细胞系也与上述结果一致;Compound C可抑制2-DG所致S6K磷酸化水平的减低;相对于LKB1突变型细胞,2-DG可以明显抑制LKB1野生型细胞的生长.
结论：在非小细胞肺癌细胞中,LKB1可以激活AMPK,LKB1/AMPK可以负向调控mTOR的活性,LKB1的抑制细胞生长的功能可能与LKB1/AMPK/mTOR信号传导途径有关.
其他文献
MicroRNA146b-5p (miR-146b-5p) is potent regulators of oncogene or supressiongene, which has been implicated in lung cancer patient prognosis.To validate the specificity of miR-146b-5p and its location
Soluble intercellular adhesion molecule-1(sICAM-1)has been implicated in tumor progression and metastasis.sICAM-1 presumably inhibits the adhesion between leukocytes and tumor cells, and thus allows t
Background and Objective: lymph node, peripheral blood and bone marrow from NSCLC patients have undetectable micrometastasis by general method, and the tumor micrometastasis is the leading cause of tu
利用FACS/Hoechst 33342,从肺癌A549细胞株中分离得到肿瘤干细胞.这种侧群细胞(SP)在整个肿瘤细胞群中占24％,用选择性ABCG2抑制剂fumitremorgin C治疗之后,侧群细胞全部消失.干细胞再增殖研究发现分离出的侧群细胞和非侧群细胞都可以产生有遗传异质性的子代细胞.但是,侧群细胞再增殖要快于非侧群细胞.MTT检测和细胞周期分布分析显示SP细胞群和非SP细胞群有相似的分
目的：探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) C677T多态性与晚期非小细胞肺癌化疗疗效的关系.方法：收集经病理学确诊的晚期NSCLC病例135例.所有患者均接受铂类药物联合吉西他滨的方案化疗.用等位基因特异-PCR技术检测患者MTHFR基因型.结果：135例晚期NSCLC病例中,MTHFR C677T T/T,T/C,dC基因频度分别为22.2％,40.0％,37.8％.C/C型与T/C型+C/
目的：利用RNA干扰(RNAi)技术,构建ABIN-1siRNA表达载体,探讨其在体外对肺腺癌细胞(A549)生长的影响.方法：合成ABIN-1siRNA,以脂质体法转染至肺腺癌A549细胞中建立稳定细胞系,并分成3组,即空白对照组、阴性对照组和ABIN1siRNA组.采用实时定量PCR和Western blot方法观察ABIN-1siRNA转染后A549细胞ABIN-1基因和相应蛋白表达的变化;
目的：探讨非小细胞肺癌患者外周血中转化生长因子β1(TGF-β1)水平与机体免疫功能的变化及其与非小细胞肺癌分期、病理类型的关系.方法：2010年10月至2011年02月昆明医学院第三附属医院胸心外科住院患者,病理证实为非小细胞肺癌(NSCLC),并依据2009年国际抗癌联盟(UICC)和国际肺癌研究会(IASLC)公布的第七版肺癌国际分期法为Ⅰ-Ⅳ期患者;同期医院体检科正常健康对照人群42例为对
目的：研究青蒿琥酯(artesunate,ART)体外诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及对表皮生长因子受体(EGFR)和ATP结合蛋白级联转运体家族成员2(ABCG2)的影响.方法：ART处理A549细胞,MTT检测细胞增殖抑制情况,流式细胞计数(Flow Cytomet ry,FCM)检测细胞凋亡,westemblot检测EGFR、p-EGFR和ABCG2蛋白的变化,real-time RT-PCR
目的：不吸烟亚裔女性肺腺癌患者是EGFR突变高发的人群,新近的研究同时也发现EML4-ALK基因融合在这一类人群中的发生率也较高.本研究的目的是确定在不吸烟亚裔女性肺腺癌患者中已知的突变驱动基因的分布.方法：选取本院2008年7月至2010年5月的104连续切除的不吸烟亚裔女性肺腺癌患者的手术标本,分析EGFR,EML4-ALK,KRAS,BRAF,PIK3CA和P53突变.结果：73例(70.2
Objective To verify the anti-cancer effect of DCs induced by HMGB1 in vitro.Methods DCs were isolated from blood of normal volunteers and cultured to mature DCs under the induction of rHMGB1.DCs pheno