【摘 要】
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目的 明确非经典Wnt通路对小鼠骨髓来源间充质干细胞(mMSC)向Ⅱ型肺泡上皮(ATⅡ)细胞分化及mMSC增殖、迁移及抗氧化应激损伤的作用和机制.方法 在体外诱导mMSC分化为AT Ⅱ细胞的基础上,分别加入非经典Wnt通路激活剂Wnt5a或同时加入JNK或PKC抑制剂SP600125或GF109203X调节非经典Wnt信号.Western blot检测通路相关信号JNK、PKC、CaMK Ⅱ及AT
【机 构】
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东南大学附属中大医院 210009
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目的 明确非经典Wnt通路对小鼠骨髓来源间充质干细胞(mMSC)向Ⅱ型肺泡上皮(ATⅡ)细胞分化及mMSC增殖、迁移及抗氧化应激损伤的作用和机制.方法 在体外诱导mMSC分化为AT Ⅱ细胞的基础上,分别加入非经典Wnt通路激活剂Wnt5a或同时加入JNK或PKC抑制剂SP600125或GF109203X调节非经典Wnt信号.Western blot检测通路相关信号JNK、PKC、CaMK Ⅱ及AT Ⅱ细胞特异蛋白pro-SPC的表达,qRT-PCR检测SPC、SPB、SPD和AQP5 mRNA水平,以评价非经典Wnt途径对mMSC向AT Ⅱ细胞分化的作用.MTT法评估该途径对mMSC增殖以及对H202诱导mMSC损伤的作用,Western blot法检测mMSC中凋亡相关蛋白Bax及Bci-2的表达,以评估非经典Wnt途径对mMSC抗氧化应激损伤的作用.划痕实验及Transwell小室实验评估该途径对mMSC的垂直及水平迁移能力.
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