【摘 要】
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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种全球性猪传染病,已成为威胁世界养猪业的主要疫病之一.PRRSV感染宿主细胞是一个多步骤且需要多种细胞
【机 构】
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西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所 农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站,陕西杨凌712100
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会
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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种全球性猪传染病,已成为威胁世界养猪业的主要疫病之一.PRRSV感染宿主细胞是一个多步骤且需要多种细胞受体参与的过程.本实验室前期研究以免疫网络学说为理论基础,利用抗PRRSV GP5的独特型抗体Mab2-5G2找到了与PRRSV感染相关的一个新的受体-NMHCⅡA.本试验以Mab2-5G2杂交瘤细胞的mRNA为模板,通过RT-PCR技术克隆其VH和VL基因;构建表达抗独特型抗体Mab2-5G2的单链可变区片段(single-chain variable antibody fragment,SFv)的慢病毒真核表达载体并转导至PRRSV易感细胞系Marc-145中,经筛选鉴定后获得了稳定表达SFv的MARC-145,不同毒株(包括VR2332,SD16,BJ-4,JXA1,CH-1a,TA-4)感染后观察病毒复制增殖情况.Western blot、IFA和病毒滴定结果表明:与对照组细胞相比,不同PRRSV毒株N蛋白表达量及病毒滴度均出现不同程度的减少或下降.本研究结果证明SFv转导MARC-145后明显抑制PRRSV的增殖,提示NMHCⅡA在PRRSV感染中发挥重要作用.以上研究结果不仅丰富了对PRRSV与受体之间相互作用的了解,也为进一步探索和寻找潜在的抗PRRSV药物靶标提供了理论依据.
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