【摘 要】
：
为了挖掘植物重金属抗性相关基因,本研究以旱柳及东南景天为实验材料,利用改进的SMART技术分别构建了早柳盐胁迫东南景天氯化镉胁迫后的全长cDNA文库,把文库包装到酵母表达载
【机 构】
：
中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省富阳市
【出 处】
：
第二届水环境污染控制与生态修复技术论坛
论文部分内容阅读
为了挖掘植物重金属抗性相关基因,本研究以旱柳及东南景天为实验材料,利用改进的SMART技术分别构建了早柳盐胁迫东南景天氯化镉胁迫后的全长cDNA文库,把文库包装到酵母表达载体中,转化酿酒酵母感受态细胞,通过在尿嘧啶缺陷型培养基上添加不同浓度梯度的筛选压来筛选酵母高抗转化子,并对其基因进行鉴定.该方法与其他克隆目的基因的方法相比,周期更短,成本更低,建立了这样一个快速稳定的克隆重金属抗性相关基因的体系后,再利用这个体系,可以从其他抗逆物种资源中快速有效地克隆抗逆相关基因.实验结果如下:
(1)构建了盐胁迫下旱柳和镉胁迫下东南景天全长cDNA文库.通过PCR鉴定,外源基因已成功转入酵母受体细胞,插入的cDNA片段均在500-2000bp之间,平均长度在1000bp左右,说明文库质量较高.
(2)通过逐步提高盐浓度和镉浓度来筛选盐胁迫下早柳和镉胁迫下东南景天全长cDNA文库,提取高抗酵母转化子的质粒并通过PCR扩增检测,得到两个耐受100g·L-1NaCi和两个耐受25mg·L-1氯化镉的阳性酵母转化子.
(3)对新的抗逆相关基因做了生物信息学分析,并对高耐盐/镉酵母转化子的生长曲线进行了测定,分别测定对照菌(转空载体重组菌INV/pYES2.1)和转cDNA重组菌在无胁迫、高盐(1mol· L-1 NaCl)和高氯化镉(150μmol·L-1)胁迫下的生长曲线.结果表明高耐盐/耐镉相关基因的表达对酵母正常生长没有影响.在含高盐或者高镉的培养基里,2个转基因重组菌的延滞期短于对照菌.这表明高耐盐/耐镉相关基因的表达可以提高酵母细胞的耐盐/耐镉能力.
其他文献
本文用矩量法求解了正三角形环天线的电流分布和输入阻抗,提供了不同线径的阻抗频带特性的理论计算曲线,结果表明,该天线具有很宽的阻抗频带特性。
In this paper, the curr
请下载后查看，本文暂不支持在线获取查看简介。
Please download to view, this article does not support online access to view profile.
卫星广播电视地面接收站通常由天线、馈源、低噪声下变频器和接收机组成,前两部分又称为室外单元。天线是卫星广播电视地面接收站的一个重要组成部分,这是和卫星广播电视的
本文介绍一个分析手风琴单音音色的实验系统。它用自适应方法计算琴音的时变功率谱,并把琴音分成上升阶段和平稳阶段,从中提取了八个特征参数送入分类器进行音色分类。分类器
短波高速数传是当前通信领域研究的一个重要方面,克服这类信道快衰落时变特性给数传带来的障碍是研究的中心课题.近些年提出和探讨的最小平方自适应均衡新技术,人们认为是解
由上海南房(集团)有限公司开发的外滩公馆(即“浦江公寓”)项目位于上海市黄浦区薛家浜路159弄1、2号,东至南浦大厦、南至多稼路、西至薛家浜路、北至规划东江阴街,毗邻南浦
网传沸沸扬扬的公积金政策悬而未定，客户针对公积金贷款的咨询日益增多。然而据观察发现，公积金缴存证明在办理非交易类贷款时的辅助功能愈加凸显，因此缴存公积金对不少借款人来说十分重要。 抵押贷款额度不足，公积金缴存能做辅助证明 市民李女士是一家私企的老板，在丰台区买了套两居室。今年国庆节儿子结婚以后，她打算给儿子买辆车，因此准备用自己名下的房产申请抵押贷款。她在咨询了几家银行后得知，由于自己名下的房
目的:在对孕妇进行护理管理的过程中,对潜在的危险因素进行分析,并提出相应的解决对策.方法:随机选择我院2018年10月至2019年9月在护理管理中出现危险的孕妇56例为临床观察对
结合96年晋江下游分水方案,对晋江流域上游水量分配的研究思路与研究重点进行分析与探讨,以水资源可持续利用,权责利相统一,公平兼顾效率作为分水的基本原则,将流域地表水资
本文提出一种用于匀速直线运动模糊图象模糊检测的新方法。这种方法基于图象的自相关函数,并且用图象的轮廓特征代替灰度特征,用以减少运算量。本方法的优点是运算量小,处理