高糖高脂诱导内皮细胞衰老的实验研究

来源 :中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shmi1
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  目的:随着社会经济的不断发展,人们的生活水平不断提高,生活方式、饮食结构发生了重大改变,大量高糖、高脂、高热量的“三高”食品被摆上餐桌.能量的过多摄入,导致了肥胖及其相关代谢性疾病发病率正逐年上升严重地危害了人类健康.越来越多的研究表明,高血糖和高血脂导致的血管内皮细胞的损伤介导其功能障碍与多种代谢性疾病的发生发展密切相关,包括高血压、冠状动脉性心脏病、糖尿病等.c-met 酪氨酸激酶是肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的高度亲和性受体,在正常细胞和肿瘤细胞中均有表达,是导致细胞增殖的重要原因.本研究主要采用饱和脂肪酸(棕榈酸)和葡萄糖联合诱导内皮细胞衰老模型,及探讨影响细胞衰老的可能分子机制,为临床相关代谢性疾病的防治提供新的思路.方法:利用MTT 法筛选棕榈酸联合葡萄糖抑制小鼠内皮细胞ms-1 的合适浓度;然后应用β-半乳糖苷酶染色方法显示内皮细胞MS-1 衰老特征.实时定量PCR 检测差异表达的miRNA,及相关基因mRNA 的表达水平;western blot 法检测相关基因的蛋白水平.结果:β-半乳糖苷酶染色结果显示棕榈酸联合高糖处理内皮细胞,蓝染细胞多于单独处理组及阴性对照组,细胞衰老特征明显.实时定量PCR 检测联合处理组miR-206 高表达,基因c-met 和PD-L1 表达下调,western blot 实验结果显示c-met、PD-L1 和stat3 蛋白表达下调.结论:高糖高脂可诱导小鼠内皮细胞ms-1 衰老,使miR-206 高表达,抑制c-met 和PD-L1 的表达,介导内皮细胞衰老损伤.
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