【摘 要】
：
细菌漆酶在生物技术应用领域具有较大的潜力,这是因为细菌漆酶与其他真菌或者植物漆酶相比具有很多显著的优点,例如广泛的底物、较宽的pH范围、较高的热稳定性以及对强碱环境的抵抗能力等.然而,由于细菌漆酶低的表达水平和催化效率,使得细菌漆酶的工业化应用受到了限制.在本研究中,通过推理假设和理性设计的方法来解决短小芽胞杆菌CotA漆酶存在的催化效率低和突变导致的热稳定性差等问题.通过定点突变的方法构建了短小
【出 处】
：
中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议
论文部分内容阅读
细菌漆酶在生物技术应用领域具有较大的潜力,这是因为细菌漆酶与其他真菌或者植物漆酶相比具有很多显著的优点,例如广泛的底物、较宽的pH范围、较高的热稳定性以及对强碱环境的抵抗能力等.然而,由于细菌漆酶低的表达水平和催化效率,使得细菌漆酶的工业化应用受到了限制.在本研究中,通过推理假设和理性设计的方法来解决短小芽胞杆菌CotA漆酶存在的催化效率低和突变导致的热稳定性差等问题.通过定点突变的方法构建了短小芽胞杆菌CotA漆酶双突变体L386W/G417L,与野生型CotA漆酶相比较,双突变体L386W/G417L的催化效率提高到原来的4.3倍,但是双突变体L386W/G417L的热稳定性却有大幅度的降低.为了改善双突变体L386W/G417L的热稳定性,构建并获得了一株三突变体L386W/G417L/G57F.结果表明,三突变体L386W/G417L/G57F的热稳定性得到了显著提高.双突变体L386W/G417L和三突变体L386W/G417L/G57F与其他突变体相比,在pH10的条件下对工业染料都具有良好的脱色能力.综上所述,由于三突变体L386W/G417L/G57F具有高活性和热稳定性,使得其具备了生物技术应用前景.CotA漆酶可以通过进一步地分子改造使其作为增强剂应用到染料废水的物理和化学处理过程中,从而提高废水的脱色效率.
其他文献
大肠杆菌植酸酶appA,属于组氨酸酸性磷酸酶家族,是一种酶活高,pH作用范围广的饲料添加剂.植酸酶appA上存在三个糖基化位点NVTl39-14l、NVS204-206和NWT317-319,分别位于α-螺旋、β-片层和无规则卷曲上.为探讨N-糖基化对植酸酶appA酶学性质的影响,本研究将植酸酶基因appA在毕赤酵母中进行了表达,利用定点突变技术构建了植酸酶去糖基化突变体appA-1NQ,appA
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)也称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种严重的病毒性传染病,该病以引起母猪的繁殖障碍、仔猪和育成猪呼吸道症状及高死亡率为主要特征。该病传播速度极快,是
由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的结核病严重危害人类的健康.结核分枝杆菌具有特殊的细胞壁结构,与细菌增殖和存活、感染、致病性、免疫逃逸等有关.细胞壁核心结构由分枝菌酸、聚阿拉伯半乳糖和肽聚糖构成,分枝菌酸-聚阿拉伯半乳糖通过二糖衔接分子：L-鼠李糖-D-N-乙酰葡糖胺与肽聚糖共价连接.在细胞壁中,还存在非共价结合的糖脂、细胞壁蛋白,其中一些细胞壁蛋白是甘露
Neural tube defects(NTDs)are severe,common birth defects that result from failure of neural tube closure,but their complex etiology either genetic or enviromental are not yet fully understood.In recen
Formaldehyde is implicated in epigenetics and in the pathologies of various chronic diseases such as neurodegenerative diseases,cancers and diabetes.Although several pathways in production of formalde
肿瘤发生一般被看做遗传因素(先天DNA 基因突变或易感、或者修复机制不完善等)与环境因素(物理、化学和生物因素等)互作造成的结果，最终DNA 突变是引发癌症发生的唯一原因。这一模型中，所有环境因素最终需要通过引发DNA 结构异常来发挥效应，是否还有其它可能？基于神经系统蛋白质磷酸化与学习记忆的结果(离子通道磷酸化造成短期记忆，而转录因子磷酸化进而增加基因表达则参与长期记忆)，提出癌症发生的组蛋白修
Despite the fundamental importance of proteasomal degradation in cells,little is known about whether and how the 26S proteasome itself is regulated in coordination with various physiological processes
N-acetyltransferase(NAT)is a kind of enzyme that catalyzes the transfer of acetyl group between acetyl-coA and amine.Bombyx mori,a model lepidoptera insect,is an economic insect.In this study,accordin
小鼠7号染色体上的Ttyh1基因能够编码450个氨基酸,是一种由5个预测跨膜区段组成的糖基化蛋白.TTYH1蛋白在神经系统中大量表达,小鼠体内的Ttyh1基因失活可导致神经系统形成之前的早期胚胎致死,由此可知,Ttyh1基因在小鼠的胚胎发育中是必需的,对早期胚胎细胞的存活至关重要.我们前期的研究结果显示Ttyh1在胚胎期小鼠大脑皮层的脑室下带区特异性表达,并有时间特异性.在神经干细胞中转染Ttyh
DNA 硫修饰是发生在DNA 磷酸骨架上的新型DNA 修饰类型.本实验室前期克隆和表达了一个既可以切割5mC 甲基化修饰又可以切割DNA 硫修饰DNA 的限制性内切酶SCO4631.结构生物学揭示其结构由四个结构域构成(Head、SBD、SRA、HNH),其中SBD 结构域结合磷硫酰化修饰DNA,SRA 结合5mC 修饰的DNA,它们共同使用HNH 结构域切割DNA,并且二聚体形式存在.体外实验发