【摘 要】
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目的 探讨δ-生育三烯酚对人结肠癌细胞SW620细胞增殖抑制作用,研究Notch信号通路中关键蛋白在δ-生育三烯酚抑制结肠癌细胞增殖中的表达及意义.方法 (1)观察δ-生育三烯
【机 构】
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天津市疾病预防控制中心,天津300011
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目的 探讨δ-生育三烯酚对人结肠癌细胞SW620细胞增殖抑制作用,研究Notch信号通路中关键蛋白在δ-生育三烯酚抑制结肠癌细胞增殖中的表达及意义.方法 (1)观察δ-生育三烯酚抑制结肠癌细胞增殖的作用(MTT试验).接种于24孔板的人结肠癌细胞SW620进入对数生长期后,将SW620换成给予不同浓度的δ-生育三烯酚(终浓度为0,5,10,15,20,25和30 μmol·L-1)的培养基,溶剂对照组为无水乙醇,继续于相同条件下培养24 h后,加入MTT溶液,继续培养4h,酶标仪检测各孔OD值,并计算细胞存活率.(2)通过免疫细胞化学方法检测Notch信号通路关键蛋白Notch,Jagged的表达变化.(3)放线菌酮(CHX)对生育三烯酚抑制结肠癌细胞增殖作用的影响.接种于24孔板的人结肠癌细胞SW620进入对数生长期后,加入CHX的完全培养液,37℃培养1h后,加入终浓度为20 μmol·L-1的δ-生育三烯酚,上述方法进行MTT试验,并计算细胞存活率.结果 (1)在5,10,15,20,25和30 μmol·L-1的剂量范围内,随着δ-生育三烯酚浓度的增加,SW620细胞的存活率呈显著下降的趋势,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).(2) Notch信号通路关键蛋白Notch1在生育三烯酚作用一定剂量范围内表达量降低,Jagged1蛋白随着生育三烯酚作用剂量的增加,其的表达量在一定剂量范围内逐渐降低.(3)经放线菌酮CHX处理过的细胞,再加入δ-生育三烯酚,作用24 h后,细胞存活率较单独加入生育三烯酚作用的细胞存活率显著增高,结果有统计学意义.结论 δ-生育三烯酚抑制人结肠癌细胞SW620增殖的过程与Notch信号通路的激活有关,细胞的死亡的方式可能为paraptosis样死亡.
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