【摘 要】
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目的:体外提取犬的年轻恒牙牙髓组织,分离培养出牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)并进行鉴定。方法:根据5~6个月龄的比格犬CBCT结果,挑选健康年轻恒牙,获取牙髓组织
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目的:体外提取犬的年轻恒牙牙髓组织,分离培养出牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)并进行鉴定。方法:根据5~6个月龄的比格犬CBCT结果,挑选健康年轻恒牙,获取牙髓组织,分别采用酶消化法和组织块贴壁法提取牙髓的原代细胞,待75%~85%融合按1:3比例传代,取第2~6代细胞作为各项细胞实验的对象,包括详细观察和记录细胞形态、生长特性,采用细胞免疫荧光的方法检测细胞蛋白表达,利用流式细胞术鉴定细胞表面抗原。结果:酶消化法和组织块贴壁法,两种方法均可分离培养出贴壁、集落样生长的短梭形成纤维样细胞,传代后也能稳定生长。免疫荧光检测表明细胞Vimentin表达阳性、牙本质涎蛋白(DSP)表达阴性或呈现很弱的阳性。流式细胞术检测表明分离培养出的细胞表达间充质干细胞的标记物(CD29、CD44、CD90、CD146)。结论:犬健康年轻恒牙牙髓组织中可稳定分离培养出牙源性间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),即牙髓干细胞(DPSC)。
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