蔬菜、水果表面环孢子虫卵囊检测方法的建立

来源 :中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xzcfjeom
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本研究旨在建立检测蔬菜、水果表面人源环孢子虫卵囊的方法.采用5.0×101个、5.0×102个、5.0×103个、5.0×104个不同数量梯度的环孢子虫卵囊对洗净的蔬菜、水果进行人工污染,并设置阴性对照;使用Alconox、雕牌、立白、白猫四种不同的洗涤剂以及去离子水,在摇床中洗涤;然后采用反复离心沉淀法对卵囊进行收集;最后基于环孢子虫18SrRNA基因位点对洗脱后收集到的卵囊进行PCR扩增.结果发现,只用100mL去离子水时,生菜、西葫芦、黄瓜、西瓜、甜瓜和草莓的最低检测浓度都是5.0×101个,而西红柿为5.0×102个;当用不同洗洁精时,检测灵敏度均能达到5.0×101个,不同洗涤剂洗脱结果无显著性差异,生菜、西葫芦、黄瓜、西瓜和甜瓜的最佳样品质量为15g,草莓为509,西红柿为100g;最佳洗脱时间为30min.本研究建立了一种检测蔬菜水果表面环孢子虫卵囊的检测技术,为食源性环孢子虫的溯源提供技术支持.
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